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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 有关质粒的提取
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

[求助] 有关质粒的提取 已有1人参与

我是第一次提取细菌中的质粒，用的是天根的质粒提取的试剂盒，但是试了2次，没有提取出，我想问：（1）是不是所有的细菌都有质粒，只是个数不同？（2）按照天根试剂盒的提取方法是否应该能提取出？（3）验证的时候，是不是用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑半个小时就可以了？
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1楼 2015-03-31 19:53:04
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SAM001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-04-01 09:26:40
瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-04-01 09:27:18
当然是你转了质粒才会有质粒呀，有质粒让细菌不会被抗生素杀死。
不同质粒的拷贝数不同，高拷贝数的可能有上千个拷贝，低拷贝数一个细菌可能只有一两个。
用1%的胶跑电泳完全可以，时间不固定。可以拿出来自己看看。
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4楼2015-04-01 09:14:06
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-01 08:37:15
第一，必须要转了质粒的细菌才有，不是所有都有。如果转了有抗性的质粒又用了相应抗生素筛选，那就是所有都有。第二，应该能提出，但产率取决于很多因素。第三，一般是可以，具体要看你的质粒大小，然后看你的marker对应的带分的好不好。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-03-31 20:03:31
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxzk at 2015-03-31 20:03:31
第一，必须要转了质粒的细菌才有，不是所有都有。如果转了有抗性的质粒又用了相应抗生素筛选，那就是所有都有。第二，应该能提出，但产率取决于很多因素。第三，一般是可以，具体要看你的质粒大小，然后看你的marke ...

因为是新手，所以很多都不懂，我想问一下现在老师让我提阪崎肠杆菌的质粒，没有转质粒，我在文献中看到了像沙门氏菌质粒的提取，也没有转质粒，那像我这种情况是否可以提出？谢谢。
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3楼2015-04-01 08:40:48
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by SAM001 at 2015-04-01 09:14:06
当然是你转了质粒才会有质粒呀，有质粒让细菌不会被抗生素杀死。
不同质粒的拷贝数不同，高拷贝数的可能有上千个拷贝，低拷贝数一个细菌可能只有一两个。
用1%的胶跑电泳完全可以，时间不固定。可以拿出来自己看看 ...

也就是说，我从原始的菌株中是提不到质粒的？
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5楼2015-04-01 09:27:54
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