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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

[求助] 有关质粒的提取 已有1人参与

我是第一次提取细菌中的质粒,用的是天根的质粒提取的试剂盒,但是试了2次,没有提取出,我想问:(1)是不是所有的细菌都有质粒,只是个数不同?(2)按照天根试剂盒的提取方法是否应该能提取出?(3)验证的时候,是不是用1%的琼脂糖凝胶电泳,跑半个小时就可以了?
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SAM001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-04-01 09:26:40
瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-04-01 09:27:18
当然是你转了质粒才会有质粒呀,有质粒让细菌不会被抗生素杀死。
不同质粒的拷贝数不同,高拷贝数的可能有上千个拷贝,低拷贝数一个细菌可能只有一两个。
用1%的胶跑电泳完全可以,时间不固定。可以拿出来自己看看。
4楼2015-04-01 09:14:06
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-01 08:37:15
第一,必须要转了质粒的细菌才有,不是所有都有。如果转了有抗性的质粒又用了相应抗生素筛选,那就是所有都有。第二,应该能提出,但产率取决于很多因素。第三,一般是可以,具体要看你的质粒大小,然后看你的marker对应的带分的好不好。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-03-31 20:03:31
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxzk at 2015-03-31 20:03:31
第一,必须要转了质粒的细菌才有,不是所有都有。如果转了有抗性的质粒又用了相应抗生素筛选,那就是所有都有。第二,应该能提出,但产率取决于很多因素。第三,一般是可以,具体要看你的质粒大小,然后看你的marke ...

因为是新手,所以很多都不懂,我想问一下现在老师让我提阪崎肠杆菌的质粒,没有转质粒,我在文献中看到了像沙门氏菌质粒的提取,也没有转质粒,那像我这种情况是否可以提出?谢谢。
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
3楼2015-04-01 08:40:48
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by SAM001 at 2015-04-01 09:14:06
当然是你转了质粒才会有质粒呀,有质粒让细菌不会被抗生素杀死。
不同质粒的拷贝数不同,高拷贝数的可能有上千个拷贝,低拷贝数一个细菌可能只有一两个。
用1%的胶跑电泳完全可以,时间不固定。可以拿出来自己看看 ...

也就是说,我从原始的菌株中是提不到质粒的?
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
5楼2015-04-01 09:27:54
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