应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于常规聚丙烯酰胺凝胶电泳样品的处理
151/2返回列表12下一页
查看: 1761  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

winnerzhi

金虫 (正式写手)

[求助] 关于常规聚丙烯酰胺凝胶电泳样品的处理 已有4人参与

我想用常规聚丙烯酰胺凝胶电泳检测一种菌所产的胞外酶，将液体培养基离心，浓缩，透析后按照郭尧君那本蛋白质电泳技术中样品处理的方法，配制样品缓冲液，发现加进样后根本看不到溴酚蓝的颜色，请问液体样品在点用前应该怎样处理？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
那么多的未知构成了美妙的人生
1楼 2015-03-30 21:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
winnerzhi: 金币+2 2015-03-31 10:23:10
我做的时候需要把样品沸水浴3分钟，12000r/min离心一分钟，点样的时候吸取上清液

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
2楼2015-03-31 07:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
winnerzhi: 金币+4 2015-03-31 10:23:58
你是加样之后就看不到吗？我用的是2*上样你如果还是不行，就用5*的试试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
3楼2015-03-31 08:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡程

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
winnerzhi: 金币+4 2015-03-31 10:24:29
我们用的 是5*上样缓冲液，如果样品浓度过高用PBS稀释的
赞一下 回复此楼
做最好的自己
4楼2015-03-31 08:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winnerzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by halfbeer at 2015-03-31 07:57:04
我做的时候需要把样品沸水浴3分钟，12000r/min离心一分钟，点样的时候吸取上清液

那蛋白质岂不是变性了
赞一下 回复此楼
那么多的未知构成了美妙的人生
5楼2015-03-31 10:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winnerzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by halfbeer at 2015-03-31 08:00:49
你是加样之后就看不到吗？我用的是2*上样你如果还是不行，就用5*的试试

对啊，单用缓冲液加进去也看不到颜色
赞一下 回复此楼
那么多的未知构成了美妙的人生
6楼2015-03-31 10:23:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winnerzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 胡程 at 2015-03-31 08:43:41
我们用的 是5*上样缓冲液，如果样品浓度过高用PBS稀释的

溴酚蓝的量是不是需要实验确定的？
赞一下 回复此楼
那么多的未知构成了美妙的人生
7楼2015-03-31 10:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡程

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by winnerzhi at 2015-03-31 10:24:25
溴酚蓝的量是不是需要实验确定的？...

咱们做的不同，我做的是转化后的（大肠杆菌，仅做参考）  一般是3毫升菌液离心后加入20微升5*上样缓冲液和160微升PBS，煮沸6分钟，离心取上清。上样缓冲液配方是：0.6毫升的1MTris-Hcl（PH6.8），5毫升50%的甘油（甘油：水=1:1），2毫升10%的SDS，去离子水稀释至10毫升，分装成500微升每管。临用前加入（1管）25微升β-巯基乙醇即可。
赞一下 回复此楼
做最好的自己
8楼2015-03-31 13:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winnerzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 胡程 at 2015-03-31 13:58:28
咱们做的不同，我做的是转化后的（大肠杆菌，仅做参考）  一般是3毫升菌液离心后加入20微升5*上样缓冲液和160微升PBS，煮沸6分钟，离心取上清。上样缓冲液配方是：0.6毫升的1MTris-Hcl（PH6.8），5毫升50%的甘油（ ...

哦...你做的是SDS-PAGE，我做的是常规的PAGE
赞一下 回复此楼
那么多的未知构成了美妙的人生
9楼2015-03-31 14:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by winnerzhi at 2015-03-31 10:23:51
对啊，单用缓冲液加进去也看不到颜色...

不可能，起码是蓝色

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
10楼2015-03-31 22:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 winnerzhi 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +4 脱颖而出 2026-03-16 8/400 2026-03-18 12:05 by 上岸上岸……..
[考研] 311求调剂 +10 冬十三 2026-03-15 11/550 2026-03-18 09:04 by zhukairuo
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +4 梨花珞晚风 2026-03-17 4/200 2026-03-17 13:38 by houyaoxu
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭