24小时热门版块排行榜    

查看: 3441  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

angnay

铜虫 (著名写手)

[求助] 体外转录没有条带的问题 已有1人参与

大家好,最近在做体外转录实验,转录完用dnase除dna,沉淀后, 再拿乙醇洗。 水溶解后跑变形的琼脂糖凝胶电泳,什么条带都没有,用nanodrop测rna浓度是50ng/ul,这是转录成功了吗?为什么电泳没有条带啊?一般转录完后的rna浓度是多少啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SEU喂96

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sssnnnfff at 2017-05-22 12:50:38
你好!我和你遇到了同样的问题,体外转录效率很低,条带非常弱而且时有时无,一纯化就什么都没有了。你的问题解决了吗?跪求!!!

同问,没有特异条带,是弥散的状态,或者是很多个条带,是否是体外转录后被降解了?
3楼2018-07-03 17:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

sssnnnfff

新虫 (初入文坛)

你好!我和你遇到了同样的问题,体外转录效率很低,条带非常弱而且时有时无,一纯化就什么都没有了。你的问题解决了吗?跪求!!!
2楼2017-05-22 12:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个,你需要跑PAGE胶。50ng/ul是比较低,PAGE才能看到。
我觉得你可能做的有问题,一般产量应该是ug级的。转录完不用除dna,直接用纯化RNA的试剂盒就行了。RNA产量是原始DNA模版的百万倍。
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-07-04 10:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +5 majunge000 2026-08-10 5/250 2026-08-12 18:31 by wangze12014
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +8 Tide man 2026-08-11 8/400 2026-08-12 17:30 by Vivilian
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 35/1750 2026-08-12 14:38 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见