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lll6001835

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:怎么才能弄到大量的1000bp的DNA,对序列没要求,只要求长度。。 已有7人参与

求助:怎么才能弄到大量的1000bp的DNA,对序列没要求,只要求长度。。。除了Pcr还可以有什么方法。。。本人是化学专业的,实在不太懂生物这方面的。或是有没有什么试剂公司给直接合成1000bp的DNA??
谢谢,金币不多,不吝赐教。。。
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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lll6001835: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-18 09:02:25
合成太贵了,没意义,你只要1000大小的很简单,你去找找做克隆的朋友,要点很简单的,设计个引物PCR扩增下是最简单的方法,
或者酶切,那个太麻烦了,
4楼2014-09-17 10:25:07
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bwangel

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lll6001835 at 2014-09-17 10:37:59
我是之前一直在P,之前p的好好的,后来就p不出来了。生气了,就想怎么才能搞到1000bp的DNA。因为我不是做生物的,我只是要这个DNA做我后面的实验,结果我一直卡在这里。。。无语了都。。...

这个没什么难度,而且你之前P的好好的,后面P不出来估计是你的问题,会不会药什么坏了,或者模板坏了什么的,合成实在太贵,别考虑了,除非你老板钱太多了
6楼2014-09-17 12:31:43
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我党精英

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-17 12:31:43
这个没什么难度,而且你之前P的好好的,后面P不出来估计是你的问题,会不会药什么坏了,或者模板坏了什么的,合成实在太贵,别考虑了,除非你老板钱太多了...

说的很有道理,楼主再看看PCR条件,可能有一点小差错,一点小差错可能就出问题了,pcr条件,酶什么的
7楼2014-09-17 21:59:05
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我党精英

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lll6001835: 金币+4, 有帮助 2014-09-18 09:03:04
或者可以找个做生物的朋友要一点,这个做分子生物的应该有很多。
8楼2014-09-17 22:01:35
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
生工可以合成,3.8元/bp。
2楼2014-09-17 09:47:39
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lll6001835

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-09-17 09:47:39
生工可以合成,3.8元/bp。

生工只合成单链的DNA,我要双链的。另外3.8bp也太贵了些。我要大量,1OD就3800,老板得杀了我
3楼2014-09-17 10:14:59
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lll6001835

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-17 10:25:07
合成太贵了,没意义,你只要1000大小的很简单,你去找找做克隆的朋友,要点很简单的,设计个引物PCR扩增下是最简单的方法,
或者酶切,那个太麻烦了,

我是之前一直在P,之前p的好好的,后来就p不出来了。生气了,就想怎么才能搞到1000bp的DNA。因为我不是做生物的,我只是要这个DNA做我后面的实验,结果我一直卡在这里。。。无语了都。。
5楼2014-09-17 10:37:59
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这是自己要做marker呀?随便找个确定大小的基因或者目标序列,设计一个引物,从基因组或者cDNA文库里扩吧?但是特异性要有保证。
没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
9楼2014-09-19 16:40:21
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caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你要1000bp完全可以去买带1000bp的marker,再胶回收就OK了。1管marker也便宜,你买便宜一点的,像康为啊,都很便宜。大概40块钱一管,1管有500微升,1微升10ng,绝对够用。
10楼2014-09-21 10:44:49
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