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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】体外转录11kb的片段用哪个公司的试剂比较好？
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】体外转录11kb的片段用哪个公司的试剂比较好？

体外转录的试剂盒我了解过pomega 和ambion的，关键我要转录11kb的，不知道哪个公司的有优势，或者还有没其它公司更好产品，望各位推荐推荐，谢谢！
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1楼 2010-11-07 20:27:03
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plantaqp

金虫 (正式写手)
tuodecai(金币+1):十分感谢！ 2010-11-08 10:11:12
我用过ambiond的不过没你那么长，我也就1500bp吧，效果不错。
实验目的可能也不一样，我是转录mRNA注射细胞表达蛋白，测蛋白活性的。
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2楼2010-11-08 06:26:54
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lsbrc

银虫 (小有名气)
tuodecai(金币+1):谢谢，不过您说的我看了，是反转录合成cDNA的吧？我要的转录出RNA的，有点儿差别。 2010-11-08 19:11:54
Invitrogen的SuperScriptIII，价格贵。
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4楼2010-11-08 13:16:58
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plantaqp

金虫 (正式写手)
tuodecai(金币+1):呵呵，摩擦接种确实应该多做几次，谢谢！ 2010-11-09 11:37:43
引用回帖:
Originally posted by tuodecai at 2010-11-08 10:17:46:

   
你好，请问你是只做体外转录，然后体内表达吧，我也是只是通过体外转录出一个植物病毒的基因组RNA，然后拿来做摩擦接种植株叶片的。所以我需要的是能转录出全长的RNA。谢谢!

不管是那一种那转录出来你的RNA就好。找个好的公司的试剂盒，产品说明书说的能满足你的需要一般就没有问题的。
另外摩擦接种的效率有多高？感觉是个技术活。

[ Last edited by plantaqp on 2010-11-9 at 03:14 ]
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5楼2010-11-09 03:03:23
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thendlee

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
tuodecai(金币+2): 十分感谢！ 2011-11-20 09:59:03
MBI的 transcriptaid T7 HIGH YIELD transcription KIT我转录的是12KB的 带有T7启动子的 不知道你用的是什么
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6楼2011-11-18 15:48:40
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bbwalkman

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
tuodecai(金币+1): 谢谢，能否留个联系方式向你详细咨询下，望赐教，谢谢！ 2011-11-20 10:12:40
你是只做转录的话TaKaRa的转录酶就可以啊，看看你的启动子是什么，价格适中，效果也可以。。。
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7楼2011-11-18 20:15:08
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by plantaqp at 2010-11-08 06:26:54:
我用过ambiond的不过没你那么长，我也就1500bp吧，效果不错。
实验目的可能也不一样，我是转录mRNA注射细胞表达蛋白，测蛋白活性的。

你好，请问你是只做体外转录，然后体内表达吧，我也是只是通过体外转录出一个植物病毒的基因组RNA，然后拿来做摩擦接种植株叶片的。所以我需要的是能转录出全长的RNA。谢谢!
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3楼2010-11-08 10:17:46
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by thendlee at 2011-11-18 15:48:40:
MBI的 transcriptaid T7 HIGH YIELD transcription KIT我转录的是12KB的 带有T7启动子的 不知道你用的是什么

我用的是ambion公司的mMESSAGE mMACHINE Kit    用的是T7启动子的  PCR产物为模板的， 转了好几次都失败了，不过连对照也不理想，我觉得问题很多，跑普通的琼脂糖电泳发现降解较严重，正愁着没办法解决，能否留个QQ和电话号码，我想向你请教下详细的操作，请赐教，谢谢！
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8楼2011-11-20 10:08:01
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fuweilin2013

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by tuodecai at 2011-11-20 10:08:01
我用的是ambion公司的mMESSAGE mMACHINE Kit    用的是T7启动子的  PCR产物为模板的， 转了好几次都失败了，不过连对照也不理想，我觉得问题很多，跑普通的琼脂糖电泳发现降解较严重，正愁着没办法解决，能否留个Q ...

我也在做体外转录，也失败了，想 请教详细操作，谢谢！
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10楼2013-10-27 21:46:20
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doctorzizhen

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最后您成功没有？选的是哪个公司试剂盒呢？谢谢
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11楼2015-08-14 23:55:39
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by doctorzizhen at 2015-08-14 23:55:39
最后您成功没有？选的是哪个公司试剂盒呢？谢谢

我用过ambion和promega两家公司的。应该都可以，不过我是用promega的做出来的。

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12楼2015-08-15 00:14:50
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bbwalkman9楼
2011-11-20 10:32   回复  
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1 [ Last edited by bbwalkman on 2011-11-26 at 11:07 ]
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