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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 高GC目的基因克隆
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berry94

铁虫 (初入文坛)

[求助] 高GC目的基因克隆 已有2人参与

各位大侠，我的基因GC含量是70%，我制作模板时用race试剂盒能成功反转录出来吗？感谢相助
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实验快快出结果
1楼 2015-03-10 10:51:17
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
berry94(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-03-11 20:27:54
引用回帖:
4楼: Originally posted by berry94 at 2015-03-10 18:13:51
大侠有这方面的经验是吧？

首先实验的成功是多方面因素决定的，尤其是分子实验，看不见摸不着的。
反转录不是很有经验，但还是那个道理，如楼上所说有专门针对高GC的试剂盒，我在PCR扩增的时候，常有高GC模板，也扩增不出来，所以在选酶的时候就考虑到”专门针对“字眼，专门针对高GC或复杂模板，同时自己进行体系的优化，结果都能扩增出来。反正试剂是一方面，自己的条件摸索是一方面，总体来说，还是靠着两方面，理论上讲能成功
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-03-11 09:04:07
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Genloci有Hi G-CBuffer专门针对GC含量高的基因克隆

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-03-10 13:28:34
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berry94

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-10 11:51:52
能

大侠有这方面的经验是吧？
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实验快快出结果
4楼2015-03-10 18:13:51
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berry94

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-11 09:04:07
首先实验的成功是多方面因素决定的，尤其是分子实验，看不见摸不着的。
反转录不是很有经验，但还是那个道理，如楼上所说有专门针对高GC的试剂盒，我在PCR扩增的时候，常有高GC模板，也扩增不出来，所以在选酶的时 ...

好吧，谢谢你噢，你们说的高GC试剂盒是反转录用的，还是做PCR克隆用的呀
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实验快快出结果
6楼2015-03-11 19:56:15
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