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luoriyuguwu

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC2、3分钟出峰,4个标准品和在出了一个大峰,求原因。 已有8人参与

HPLC,紫外检测器,流动相:乙腈-0.3%(v/v)磷酸水溶液为流动相
梯度洗脱:0-30min,10-14%乙腈,30-35min,14-8%乙腈(4个碳苷黄酮分析条件)
流速:1.0ml/min
检测波长:340nm
柱温:30℃
前一段时间出峰是四个分开的峰,隔了半年又做,同样的条件,就成了三分钟就出了一个大峰。求助,本人马上要毕业,这块数据一直出不来!

HPLC2、3分钟出峰,4个标准品和在出了一个大峰,求原因。
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HPLC2、3分钟出峰,4个标准品和在出了一个大峰,求原因。-1
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我是来自四川的刚子
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JinyHuang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
3分钟出了一个大峰也不对啊,你看看响应值,下面几个加起来都没有上面那么多……你样品有没有配错?流动相有没配错?还有严格意义上讲你下面的图谱后面几个峰分离度也不行……建议换柱子,换流动相,调流动相比例等几种方法去做
8楼2015-03-08 23:07:17
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先看你的流动相有没有配错,要是没有的话,可能是你的柱子废了
分离、分离
2楼2015-03-07 08:35:31
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很明显,样品没有保留。色谱柱有问题吗?流动相没有配错吧?建议检查一下,别的想不出什么原因
3楼2015-03-07 09:29:56
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先请检查一下0.3%的磷酸水溶液的pH为多少,再查查色谱柱的耐酸碱范围,最后请换一根色谱柱试试。最大的可能是色谱柱坏了。
归零
4楼2015-03-07 10:21:52
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