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铁虫 (初入文坛)

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[求助] 跑hplc在10min内出峰

有一个样品是在硅胶上用石油醚：乙酸乙酯=4:1洗脱:下来的，在薄层上用石油醚乙酸乙酯冰乙酸210.01展开，Rf值在0.5的时候有一个斑点，365nm下没有荧光，254nm下有暗斑。
在液相上用C18柱洗脱剂走的是等度甲醇水，但是比例从30%到80%都试过，总是只在前10min内出峰，用100%甲醇冲洗液有峰，请问下这种情况是不是这个样品不适合C18柱，我应该换个什么柱子，大概是个什么样的化合物，为什么这么容易被洗脱？

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1楼2013-09-23 07:35:58

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【答案】应助回帖

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这么久都没人回答，我来试试吧，薄层那个比例我没看明白，是否是2:1:0.01？应该你分离到的不是一个峰，因为硅胶洗脱时候用的石油醚乙酸乙酯系统，说明化合物极性应该很小，在C18柱子上应该出峰会比较晚，甚至会很晚，也许那个100%冲柱子出来的峰时你的峰之一，所以建议走个梯度看看，另外薄层为何不显色呢？可以提供更多的信息前10min的峰保留时间是多少?检测波长是多少？