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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 跑hplc在10min内出峰
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铁虫 (初入文坛)

[求助] 跑hplc在10min内出峰

有一个样品是在硅胶上用石油醚：乙酸乙酯=4:1洗脱:下来的，在薄层上用石油醚乙酸乙酯冰乙酸210.01展开，Rf值在0.5的时候有一个斑点，365nm下没有荧光，254nm下有暗斑。
在液相上用C18柱 洗脱剂走的是等度 甲醇水，但是比例从30%到80%都试过，总是只在前10min内出峰，用100%甲醇冲洗液有峰，请问下这种情况是不是这个样品不适合C18柱，我应该换个什么柱子，大概是个什么样的化合物，为什么这么容易被洗脱？
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1楼2013-09-23 07:35:58
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260919368

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你分析一次的时间是多少？感觉你的物质峰还没有洗脱出来，推测物质极性小，很可能没有洗脱下来（如果在洗柱子时有出溶剂外的高峰话）。最好做一下全波长扫描，确定最大吸收波长。其实你完全可以做一个梯度的洗脱，这样分离效果会好些。
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4楼2013-09-25 08:49:40
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乘风牧云

木虫 (职业作家)

--

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这么久都没人回答，我来试试吧，薄层那个比例我没看明白，是否是2:1:0.01？应该你分离到的不是一个峰，因为硅胶洗脱时候用的石油醚乙酸乙酯系统，说明化合物极性应该很小，在C18柱子上应该出峰会比较晚，甚至会很晚，也许那个100%冲柱子出来的峰时你的峰之一，所以建议走个梯度看看，另外薄层为何不显色呢？可以提供更多的信息前10min的峰保留时间是多少?检测波长是多少？
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乘长风以牧青云
2楼2013-09-24 13:01:35
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bfsn7942

金虫 (著名写手)

白发

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把甲醇换成乙腈走下试试。
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有志者，事竟成，破釜沉舟，百二秦关终属楚；苦心人，天不负，卧薪尝胆，三千越甲可吞吴。
3楼2013-09-24 14:16:07
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ever_lijuan

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

能大概知道的是哪一类物质吗？如黄酮类或别的，这样的话可以再适当选择洗脱剂，以确定流动相。
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5楼2013-09-26 08:44:16
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