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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 两条基因的原核共表达
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 两条基因的原核共表达 已有4人参与

想将两条基因Ａ和Ｂ一起原核表达，放在一个质粒的两个多克隆位点和分别放在两个质粒里，有什么区别吗？分别这样做了，做出来的结果不一样，但又不知道为什么。求指教。
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天道酬勤
1楼 2015-02-06 10:11:57
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放在一个质粒会融合表达，或移码
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2015-02-06 10:28:20
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小鼹鼠(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-06 20:51:15
前者加一种抗生素，后者要加两种。
不同的表达载体、不同的抗性表达出来的东西经常不一样，最后拿到蛋白就行了。
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3楼2015-02-06 10:51:06
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lihe131 at 2015-02-06 10:51:06
前者加一种抗生素，后者要加两种。
不同的表达载体、不同的抗性表达出来的东西经常不一样，最后拿到蛋白就行了。

所以说，不同的结果就是因为抗生素或载体的不同导致的？没有蛋白本身的关系？我的意思是两个蛋白本身之间会不会有影响？假如说有作用的话，放在两个质粒和同一个质粒中，这种影响力会不会就不同？
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天道酬勤
4楼2015-02-06 15:10:10
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多一个载体就多一种可能，尽量少用载体吧。
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永远相信未知的总是美好的！
5楼2015-02-06 17:23:06
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小鼹鼠 at 2015-02-06 15:10:10
所以说，不同的结果就是因为抗生素或载体的不同导致的？没有蛋白本身的关系？我的意思是两个蛋白本身之间会不会有影响？假如说有作用的话，放在两个质粒和同一个质粒中，这种影响力会不会就不同？...

这个就很难说了，我们之前做的就有两个相互作用组分结合不同的，不同蛋白情况不太一样。
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6楼2015-02-07 00:15:41
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wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议用双表达载体。这样两个蛋白不会互相干扰。也只有一种载体。
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7楼2015-02-07 01:59:07
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xinmuli_112

新虫 (初入文坛)
区别很大，电化学中的交换法则可以学习下。

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2015-02-07 03:04:13
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