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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » qRT-PCR模板量应该加多少？
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空谈误国

金虫 (正式写手)

潜龙勿用

[求助] qRT-PCR模板量应该加多少？已有4人参与

我模板cDNA不稀释加 2ul，目的基因CT值35,36,37（平行性一点不好）.。。。.β-actin的ct值是18（三个复孔相差0.3以内）.
内参挺好说明不是操作的问题，我在想是不是目的基因表达量低，我应该提高模板量至4ul?
但是，我突然想到是不是我模板量加多了导致目的基因CT值不稳定？请问模板量过高会产生这样的不利影响吗？
还是说我应该把模板量提高到4ul，6ul试试？
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1楼2015-01-28 14:50:36
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钰乾

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请教一下，也就是说模板浓度高会出现CT值过高的情况，你最后稀释了之后CT值正常了，是这样处理问题的吗？我现在遇到了同样的麻烦。
赞一下 回复此楼
10楼2016-03-31 07:10:30
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