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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 菌摇不起来是怎么回事
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张冰宝

新虫 (小有名气)

[求助] 菌摇不起来是怎么回事 已有5人参与

我将成功构建的重组质粒转入BL21中，挑取单克隆摇菌，amp抗性的，结果摇的非常缓慢，37度16小时OD值也才达到0.7左右。将这个菌液抽取50ul重新摇菌8h结果没有摇出来，液体澄清。不知道是怎么回事？LB和amp应该是没有问题的，因为我摇了一个对照，对照菌生长良好。请大家帮帮忙
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1楼 2015-01-16 10:16:00
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1 2015-01-16 11:37:12
很正常啊，单菌落摇菌很正常，我们一般都摇菌要十几个，不出很正常，一般是每条上或者没摇起来，时间也挺长的。
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2楼2015-01-16 11:06:27
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Gin—红与黑

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
摇3个平行吧~等时间长一点。我以前也有时间太短摇不出来的，
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3楼2015-01-16 11:49:09
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主菌液PCR看看，能不能P出来，或不加AMP摇菌看看，可能没有重组子。
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-01-16 15:55:17
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好是能多挑几个菌落。amp少加点试试看吧，有的重组子抗性弱。还有就是把长的那个做个菌落PCR看看是不是。
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最喜欢的就是最好的。
5楼2015-01-16 16:47:41
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1009238055

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉这种情况是重组DNA丢失哦，因为对照摇起来了的，做个PCR检测一下吧。
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6楼2015-01-16 16:53:44
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