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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 挑菌扩大培养提不出质粒
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Renavatio

木虫 (小有名气)

[求助] 挑菌扩大培养提不出质粒

从蓝白筛选的平板上挑取白斑扩大培养，用宝生物的试剂盒提取不出质粒
那个菌摇过了（不摇了之后菌体沉下去了）会不会影响啊？   还有就是摇菌的时候我是用的5ml的管子摇的，里面加的LB液体培养基有点多
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Undefined！
1楼 2012-05-12 10:33:32
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你加完裂解液后变粘了吗？
你菌培养的时候加没加抗性？
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未来不是梦
2楼2012-05-12 11:03:36
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Renavatio

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-12 11:03:36:
你加完裂解液后变粘了吗？
你菌培养的时候加没加抗性？

加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊！    培养的菌是DH5α，培养基里面加了氨苄的
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Undefined！
3楼2012-05-12 11:14:44
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by Renavatio at 2012-05-12 11:14:44:
加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊！    培养的菌是DH5α，培养基里面加了氨苄的

你一共挑了多少个单菌落培养，都没有长吗？
你抗性没失效吧？
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未来不是梦
4楼2012-05-12 11:25:00
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Renavatio

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-12 11:25:00:
你一共挑了多少个单菌落培养，都没有长吗？
你抗性没失效吧？

挑了四个！  菌长了，不过摇得比较久，拿出来之后菌体都沉下去了
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Undefined！
5楼2012-05-12 11:29:12
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜: 金币+1, 鼓励积极交流 2012-05-12 23:02:42
引用回帖:
5楼: Originally posted by Renavatio at 2012-05-12 11:29:12:
挑了四个！  菌长了，不过摇得比较久，拿出来之后菌体都沉下去了

amp长的一般都很快的，你是不是染菌了？
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未来不是梦
6楼2012-05-12 11:33:32
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Renavatio

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-12 11:33:32:
amp长的一般都很快的，你是不是染菌了？

这个不确定诶！
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Undefined！
7楼2012-05-12 12:56:32
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是怎么确定没提出质粒的？如果真是这样可能是杂菌吧！就算没连接成功，也会转进去空载体的吧
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8楼2012-05-12 12:56:39
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zhixuec

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能你的抗生素失效了

要不然即使不是你的重组子，转进去的是空载也会能提出质粒的
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酷爱の族
9楼2012-05-12 15:38:25
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Renavatio

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zgb1982 at 2012-05-12 12:56:39:
你是怎么确定没提出质粒的？如果真是这样可能是杂菌吧！就算没连接成功，也会转进去空载体的吧

走电泳没条带
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Undefined！
10楼2012-05-12 16:30:49
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