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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] 什么是假阳性 已有3人参与

假阳性是不是比如我原来的目的片段大小是800bp的,然后做菌落PCR跑出来是500bp,没有800bp的就叫做假阳性呢
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
假阳性是指不含目的片段的模板,经过PCR,扩展出了与目的模板bp数类似的片段,给人一种含有目的片段的假象 叫做假阳性
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-01-11 19:04:10
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
或者是说是你pcr出来的大小对,但是却不是扩出你要的目的片段
3楼2015-01-11 19:36:22
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lzpbar

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、What?假阳性就是本来为阴性的结果实际检测为阳性结果,即假的阳性结果。
2、Why?PCR实验中的假阳性结果一般是模板污染造成,即以前的PCR产物污染到了PCR体系成分(Taq酶、buffer等任一成分)引起。可通过阴性对照(no template control, NTC)的结果来判断,若阴性对照检测为阳性,可判断可能存在假阳性结果。
3、How?要避免PCR的假阳性结果,要注意几点。(1)严格分区且单向流动,配液区、加模板区、上机区、电泳区,要有防止模板污染的意识。带有模板的枪头要小心处理。(2)采用dUTP和UNG酶处理。(3)每次run都尽量平行做个NTC。
举而措之天下之民,谓之事业
4楼2015-01-12 13:04:57
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