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明日天涯线

金虫 (小有名气)

[求助] western blot 目的蛋白 已有1人参与

在做western blot时需要的目的蛋白,都有哪些?如果做细胞内的抗氧化实验,,应该提取的是哪种目的蛋白?相对应的一抗,二抗?是什么?
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
明日天涯线: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-01-16 18:41:15
答非所问: 应助指数+1, 感谢应助,望继续关注本帖 2015-01-25 09:24:02
做WB的目的蛋白当然是根据实验目的选择的,比方说,要验证是不是激活这条信号通路,当然是做这条通路里面的因子。
用WB做细胞抗氧化,也有几个层次,如果是想说明有抗氧化效果,可以选择SOD、GSH等蛋白,如果要做抗氧化激活的通路,就看具体的情况了,比如NF-kB里面p50,65等等。
二抗是统一的。

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2楼2015-01-15 14:20:33
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明日天涯线

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2015-01-15 14:20:33
做WB的目的蛋白当然是根据实验目的选择的,比方说,要验证是不是激活这条信号通路,当然是做这条通路里面的因子。
用WB做细胞抗氧化,也有几个层次,如果是想说明有抗氧化效果,可以选择SOD、GSH等蛋白,如果要做抗 ...

"用WB做细胞抗氧化,也有几个层次,如果是想说明有抗氧化效果,可以选择SOD、GSH等蛋白,如果要做抗氧化激活的通路,就看具体的情况了,比如NF-kB里面p50,65等等。"能详细介绍一下么?
3楼2015-01-16 20:09:13
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 明日天涯线 at 2015-01-16 20:09:13
"用WB做细胞抗氧化,也有几个层次,如果是想说明有抗氧化效果,可以选择SOD、GSH等蛋白,如果要做抗氧化激活的通路,就看具体的情况了,比如NF-kB里面p50,65等等。"能详细介绍一下么?...

看lz问的问题,感觉你还没有搞清楚WB的目的和意义,估计只是看别人的文献做WB所以也想做。
WB是确定某个蛋白是不是真的表达了,表达的相对含量是多少。
把握好做这个实验的目的,再找相关文献。
4楼2015-01-17 14:52:15
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