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zhoubin0823

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[求助] pcr出现问题是KOD DNA聚合酶的问题，还是缓冲体系与pcr反应条件的问题？已有2人参与

最近在做KOD DNA聚合酶的重组表达，将买来的KOD-PET15b的KOD DNA聚合酶基因重组到PET28a上，构建KOD-Pet28a重组质粒，以表达带有组氨酸标签的KOD DNA聚合酶,实验结果验证重组的基因没问题，KOD DNA聚合酶也能表达、纯化，但是在利用所纯化的酶PCR后跑核酸电泳（pcr的体系与条件按照商业酶的说明书的条件进行），pcr出来的目的条带刚开始是有的，随着时间的进行，后面跑核酸电泳没有核酸条带，请教高手，可能在哪里出现问题了？

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1楼2015-01-05 14:42:50

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puresnowlqin

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kuaile5420

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