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铁虫 (初入文坛)

[求助] 诱导蛋白表达已有1人参与

我现在用BL21菌和PET32质粒做表达，之前pet32质粒连的基因用IPTG，18℃诱导后，蛋白电泳后有目的条带。用相同的方法诱导另一个基因后就没有条带了，这是怎么回事呢？希望大家帮帮我，谢谢

1楼 2015-01-04 13:16:59

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金虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

不同的蛋白表达条件不一定是一样的，还是要对诱导条件再做摸索，比如温度，IPTG浓度，诱导时间等都改变试试，当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了

医学&统计学

2楼2015-01-04 15:58:34

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铁虫 (初入文坛)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-04 15:58:34
不同的蛋白表达条件不一定是一样的，还是要对诱导条件再做摸索，比如温度，IPTG浓度，诱导时间等都改变试试，当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了

两个基因都是从甘薯里面提取RNA，然后做RT-PCR得到的，经过测序也是正确的。第一个基因一次就成功了，后面一个基因做了好几个IPTG梯度都没有成功

3楼2015-01-06 12:15:14

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