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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 诱导蛋白表达
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)

[求助] 诱导蛋白表达 已有1人参与

我现在用BL21菌和PET32质粒做表达，之前pet32质粒连的基因用IPTG，18℃诱导后，蛋白电泳后有目的条带。用相同的方法诱导另一个基因后就没有条带了，这是怎么回事呢？希望大家帮帮我，谢谢
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1楼 2015-01-04 13:16:59
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同的蛋白表达条件不一定是一样的，还是要对诱导条件再做摸索，比如温度，IPTG浓度，诱导时间等都改变试试，当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了
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医学&统计学
2楼2015-01-04 15:58:34
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-04 15:58:34
不同的蛋白表达条件不一定是一样的，还是要对诱导条件再做摸索，比如温度，IPTG浓度，诱导时间等都改变试试，当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了

两个基因都是从甘薯里面提取RNA，然后做RT-PCR得到的，经过测序也是正确的。第一个基因一次就成功了，后面一个基因做了好几个IPTG梯度都没有成功
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3楼2015-01-06 12:15:14
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