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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)

[求助] 诱导蛋白表达 已有1人参与

我现在用BL21菌和PET32质粒做表达,之前pet32质粒连的基因用IPTG,18℃诱导后,蛋白电泳后有目的条带。用相同的方法诱导另一个基因后就没有条带了,这是怎么回事呢?希望大家帮帮我,谢谢
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不同的蛋白表达条件不一定是一样的,还是要对诱导条件再做摸索,比如温度,IPTG浓度,诱导时间等都改变试试,当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了
医学&统计学
2楼2015-01-04 15:58:34
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-04 15:58:34
不同的蛋白表达条件不一定是一样的,还是要对诱导条件再做摸索,比如温度,IPTG浓度,诱导时间等都改变试试,当然前提是你的重组质粒鉴定已经正确了

两个基因都是从甘薯里面提取RNA,然后做RT-PCR得到的,经过测序也是正确的。第一个基因一次就成功了,后面一个基因做了好几个IPTG梯度都没有成功
3楼2015-01-06 12:15:14
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