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雅瑜1994

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何确定是所需引物 已有2人参与

设计的引物放入oligo7中进行检验,发现PCR分析不错,但是有发夹结构和二聚体(具体结果见截图),这样的引物该不该用呢?如果不用的话,似乎找不到更好的引物。引物的判断标准怎么衡量呢?谢谢回答。

如何确定是所需引物
捕获.PNG
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翼在天

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
雅瑜1994(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-08 20:47:31
软件分析打分只是告诉你这个引物存在的问题,理论上来说,只要是目的基因上存在的一段序列,拿下来当做引物都可以P出目的条带,只是存在非特异性条带和其他问题。
所以,引物合不合适,一方面是设计,一方面需要你自己通过PCR调整温度和时间以及PCR体系才能得到单一且清晰的目的条带
3楼2015-01-08 19:55:18
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


雅瑜1994(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-08 20:47:17
我觉得有些分析,软件上只是起到借鉴作用,不能盲目听从而否认自己,一个知名文献上面发表了一个目的基因条件和引物序列都很好的,但是在另一个实验室由于各种原因,结果就不一样,真的,这个还要靠自己去摸索的。
2楼2015-01-08 19:46:05
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zl暖暖nn

新虫 (初入文坛)

请问有oligo7安装包吗?求分享,万分感谢
4楼2016-09-02 21:19:22
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千里两句

新虫 (小有名气)

从来不用这些软件,直接做

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-09-02 21:30:20
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