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zb杏子

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 2
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在线: 1.7小时
虫号: 3199690
注册: 2014-05-12
专业: 兽医寄生虫学

[求助] BL21表达蛋白量很低

我用BL21 表达两个甘露醇合成酶，都是用pET30a构建表达载体，第一个表达大小是42kD左右，第二个是71kD左右。第一个有表达趋势，大小正确，包涵体和可溶都有，量还可以；第二个依稀有表达，大小也差不多，包涵体中较多，可溶也有，但量少到可以忽略。第一个蛋白纯化效果还可以，第二个因为量少，相对的杂蛋白的量很大，多次纯化效果都不好，在40和70kD都会出现明显的带。且用抗His的一抗做WB，神奇的是两种蛋白在 40和70kD两个位置均出现了亮带，不同的是，第一个蛋白在目的位置40kD的带特别亮,而70kD处较弱，而第二个蛋白在两个位置的带亮度差异不大。这个求大神指点！！！！！！！！！！！！！！！！

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1楼 2014-12-22 21:09:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

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