版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

zb杏子

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 2
帖子: 3
在线: 1.7小时
虫号: 3199690
注册: 2014-05-12
专业: 兽医寄生虫学

[求助] BL21表达蛋白量很低

我用BL21 表达两个甘露醇合成酶，都是用pET30a构建表达载体，第一个表达大小是42kD左右，第二个是71kD左右。第一个有表达趋势，大小正确，包涵体和可溶都有，量还可以；第二个依稀有表达，大小也差不多，包涵体中较多，可溶也有，但量少到可以忽略。第一个蛋白纯化效果还可以，第二个因为量少，相对的杂蛋白的量很大，多次纯化效果都不好，在40和70kD都会出现明显的带。且用抗His的一抗做WB，神奇的是两种蛋白在 40和70kD两个位置均出现了亮带，不同的是，第一个蛋白在目的位置40kD的带特别亮,而70kD处较弱，而第二个蛋白在两个位置的带亮度差异不大。这个求大神指点！！！！！！！！！！！！！！！！

回复此楼

» 猜你喜欢

生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有197人回复
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点已经有0人回复
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征已经有0人回复
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗已经有25人回复
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈已经有0人回复
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点已经有0人回复
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核已经有0人回复
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序已经有0人回复
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界已经有0人回复

1楼 2014-12-22 21:09:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

重组蛋白在BL21(DE3)中表达，存在包涵体已经有12人回复
BL21菌株有没有甲基化酶？已经有12人回复
蛋白表达，大肠杆菌添加IPTG后菌液渐变澄清已经有18人回复
关于Rosetta(DE3)菌株用来做蛋白表达的相关问题。已经有3人回复
原核表达蛋白量很低已经有13人回复
做了原核表达，表达量很低，求助~~ 已经有16人回复
用大肠杆菌BL21养蛋白时菌体总是结成块状怎么办！！！已经有13人回复
用LB培养BL21(DE3)菌体总是死亡，求助！已经有16人回复
Ecoli BL21 DE3表达蛋白时突然变澄清，但非噬菌体污染，究竟是怎么回事？已经有17人回复
BL21(DE3)表达目的蛋白不稳定已经有4人回复
大肠杆菌BL21表达包涵体的问题已经有8人回复
IPTG诱导表达蛋白已经有14人回复
大肠杆菌BL21菌株表达目的蛋白时，菌液破碎前后的浑浊程度变化很不明显已经有5人回复
十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低已经有16人回复
有关蛋白表达的问题已经有25人回复
原核表达蛋白诱导不出来已经有16人回复
怎么提高诱导表达的目的蛋白含量已经有14人回复
关于DH5a和BL21的表达问题？？已经有9人回复
【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带已经有41人回复

点击这里搜索更多相关资源

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

相关版块跳转我要订阅楼主 zb杏子的主题更新

返回列表

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05	7/350	2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05	5/250	2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05	8/400	2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04	11/550	2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04	14/700	2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04	10/500	2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	11/550	2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8	ncTVBM6AOJHF 2026-11-04	12/600	2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05	10/500	2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04	12/600	2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	14/700	2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4	kvewwGtKktqB 2026-11-04	11/550	2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7	ncTVBM6AOJHF 2026-11-04	22/1100	2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4	ncTVBM6AOJHF 2026-11-04	12/600	2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4	ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04	8/400	2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	10/500	2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	9/450	2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4	hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04	12/600	2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6	ncTVBM6AOJHF 2026-11-04	10/500	2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5	iaeyuan 2026-11-01	5/250	2026-11-04 14:43 by jinchengzi