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求助蛋白复性透析问题····· 已有2人参与
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求助啊。。。。 LZ我已经看了很多关于变性复性透析的帖子，但是还是有一些解决不了的问题，不明白，不知道怎么办，所以来求助万能的虫子们了。 我是8m尿素变性，2m尿素复性，稀释复性，就是把变性液一滴一滴往复性液里加。蛋白变性之后，浓度在10mg/ml左右，复性后在0.2-0.4mg/ml左右，那么问题来了： 1.复性之后，蛋白复性液中总是有颗粒转，纤维状的物体，但是离心离不下来，整体看复性液还透明清澈，就像里面有毛毛的感觉，怎么离心都没用。 2.然后透析，用pbs透析，复性液ph在9.0，pbs没调ph，应该7.5左右吧，透析过程中没见明显沉淀，但是透析两天后换了3次液，透析过后的蛋白没有明显沉淀，但是浑浊，在透析袋离看不出浑浊，一倒出来就混了，而且跑蛋白胶什么都没有，测浓度，用水调零，什么都没有，用pbs调零，浓度能0.1mg/ml。 各位虫友们，有想法建议的跟我说说呗，愁死了。。。。  |
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