| 查看: 4723 | 回复: 53 | ||||
陈彦利铁虫 (小有名气)
|
[求助]
西红柿果肉RNA提取，降解严重 已有10人参与
|
|||
第一次提RNA，最近提西红柿果肉RNA，降解很严重（见图）。西红柿果肉在液氮中不好研磨，所以我直接在裂解液里研磨的，大概2~3g西红柿加3 mTRNzol试剂研磨（样品量是不是大了？），用的是天根的TRNzol 总 RNA 提取试剂盒，电泳用1%琼脂糖电泳，90V，电泳20min。上样时，好几次都是样品都飘起来，沉不下去，是不是乙醇挥发不彻底？请老师们同学们帮忙分析一下。提了很多次都这样，快崩溃了...求过来人指导！ 20141215_095059.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 | 火葬场 |
» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有212人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提真菌RNA有降解，是不是菌丝放置过久导致的
已经有3人回复
- RNA非常容易降解吗？
已经有4人回复
- 请问这两个RNA提取的怎么样？是不是降解的严重？
已经有9人回复
- RNA提取，怎么老是降解？求指导！！
已经有24人回复
- 大肠杆菌RNA提取求大虾帮忙
已经有9人回复
- RNA提取后跑胶泳道条带弥散，有亮带，请教这是什么原因呢？
已经有26人回复
- RNA提完电泳，条带疑似降解，第二天跑又好了，有没人遇到这种情况
已经有25人回复
- 原核生物 RNA提取
已经有17人回复
- RNA提取，5S很亮，是降解嘛？可否进行后续半定量实验？
已经有5人回复
- RNA降解，求高人分析一下原因。
已经有11人回复
- 为什么RNA总是降解！
已经有40人回复
- 猪胎盘RNA提取问题
已经有10人回复
- 植物RNA提取，跑出五条带。并且一直降解，快疯了！！！
已经有9人回复
- RNA提取出来放-80能放多久啊
已经有10人回复
- RNA出现降解，还能做后面的荧光定量PCR吗？
已经有22人回复
- 去动物组织时如何防止RNA的降解
已经有8人回复
- 【求助/交流】RNA降解问题求赐教
已经有16人回复
- 【求助/交流】RNA提的不好，基本都降解的话，逆转录后再PCR会是什么结果？
已经有20人回复
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
1.你的样品加入太多了，一般试剂盒只需要50mg-100mg样品即可，太多的话内源性的RNase太多，Trizol里的抑制剂抑制效果不完全。 2.你的电泳时间太久了，难免会分解严重。再次重复下试试，将电泳缓冲液TAE重新换制，电压调高(150V)，时间缩短（10-15min），只要能区分去三条带即可。 3.确保提取过程中操作严格，保持空气不要流动，离心机全程4℃。 4.你说的上样时会飘起来？是不是没有用Loading Buffer染色？不会是酒精没挥发完全，可以测量纯度（OD260/230）来观察，有酒精残留时候会有乱峰，参考乙醇的峰型。 希望对你有用，祝你实验顺利。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
陈彦利18楼2014-12-16 16:28:36
35楼2014-12-18 17:21:03
★
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
|
， [ 发自小木虫客户端 ] |
2楼2014-12-15 15:51:43
★
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
 |
3楼2014-12-15 15:55:44
★
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
|
|
4楼2014-12-15 15:58:09
★
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
陈彦利(金币+1): 谢谢参与
|
|
5楼2014-12-15 16:16:50
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2014-12-15 16:48:56
|
|
7楼2014-12-15 17:56:03
myyounger
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 贵宾: 0.105
- 金币: 23288.5
- 散金: 500
- 红花: 144
- 帖子: 16619
- 在线: 484.6小时
- 虫号: 638546
- 注册: 2008-10-28
- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
8楼2014-12-15 18:08:19
|
|
9楼2014-12-15 19:10:42
| 祝福祝福发祝福 |
10楼2014-12-15 19:57:08
