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nculst

银虫 (正式写手)

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专业: 色谱分析

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

提RNA降解的原因主要在于样品本身的酶和空气环境中的酶，楼主这个能隐约看到条带了，可以考虑研磨前将样品弄细点以保证尽可能浸泡在裂解液里，或者电压调高时间变短些，120V，10min试试~

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31楼2014-12-18 09:32:02

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523875855

32楼2014-12-18 15:49:14

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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

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专业: 微生物生理与生物化学

关键就是没在液氮里做！

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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

33楼2014-12-18 15:56:37

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onlyforjoy

木虫 (著名写手)

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感谢楼主

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34楼2014-12-18 17:03:06

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chriscda

木虫 (小有名气)

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专业: 动物遗传学

【答案】应助回帖

一般性地，建议你注意这些事项：1. TRIzol一般需要达到样品的10倍体积；2. 全程使用RNase-free的耗材、试剂（包括水）和新鲜的电泳缓冲液； 3. 在5-10分钟内完成电泳。
不过，具体到你的实验，我觉得不像是发生严重降解，或者说我没觉得有降解。可能是RNA载样过多，染料（可能你用的EB，其他的也差不多）被小分子量的RNA吸附得差不多了，大分子量的18S和28S就会变暗。发生降解是你会观察到各个条带分子量都有变小，跑出弥散的结果。

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35楼2014-12-18 17:21:03

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