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nculst

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提RNA降解的原因主要在于样品本身的酶和空气环境中的酶,楼主这个能隐约看到条带了,可以考虑研磨前将样品弄细点以保证尽可能浸泡在裂解液里,或者电压调高时间变短些,120V,10min试试~
31楼2014-12-18 09:32:02
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32楼2014-12-18 15:49:14
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

关键就是没在液氮里做!

[ 发自小木虫客户端 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
33楼2014-12-18 15:56:37
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onlyforjoy

木虫 (著名写手)

感谢楼主
34楼2014-12-18 17:03:06
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chriscda

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般性地,建议你注意这些事项:1. TRIzol一般需要达到样品的10倍体积;2. 全程使用RNase-free的耗材、试剂(包括水)和新鲜的电泳缓冲液; 3. 在5-10分钟内完成电泳。
不过,具体到你的实验,我觉得不像是发生严重降解,或者说我没觉得有降解。可能是RNA载样过多,染料(可能你用的EB,其他的也差不多)被小分子量的RNA吸附得差不多了,大分子量的18S和28S就会变暗。发生降解是你会观察到各个条带分子量都有变小,跑出弥散的结果。
35楼2014-12-18 17:21:03
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36楼2014-12-18 20:25:02
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37楼2014-12-19 11:14:23
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38楼2014-12-19 11:24:34
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39楼2014-12-19 12:30:42
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40楼2014-12-19 20:39:04
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