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11楼2014-12-15 21:20:38
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lizhiquan

新虫 (初入文坛)

我最近提的RNA降解也很严重,只有一条带,不知道怎么回事
12楼2014-12-15 23:41:38
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13楼2014-12-16 08:03:41
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fishlone

金虫 (著名写手)

祝福楼主~
14楼2014-12-16 10:05:50
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15楼2014-12-16 13:03:15
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16楼2014-12-16 13:14:56
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祝福
17楼2014-12-16 15:07:11
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liyuecoool

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.你的样品加入太多了,一般试剂盒只需要50mg-100mg样品即可,太多的话内源性的RNase太多,Trizol里的抑制剂抑制效果不完全。
2.你的电泳时间太久了,难免会分解严重。再次重复下试试,将电泳缓冲液TAE重新换制,电压调高(150V),时间缩短(10-15min),只要能区分去三条带即可。
3.确保提取过程中操作严格,保持空气不要流动,离心机全程4℃。
4.你说的上样时会飘起来?是不是没有用Loading Buffer染色?不会是酒精没挥发完全,可以测量纯度(OD260/230)来观察,有酒精残留时候会有乱峰,参考乙醇的峰型。
希望对你有用,祝你实验顺利。

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18楼2014-12-16 16:28:36
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)

路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利!
19楼2014-12-16 18:44:19
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20楼2014-12-16 23:15:49
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