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11楼2014-12-15 21:20:38

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lizhiquan

新虫 (初入文坛)

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专业: 食品加工技术

我最近提的RNA降解也很严重，只有一条带，不知道怎么回事

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12楼2014-12-15 23:41:38

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346585890

13楼2014-12-16 08:03:41

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fishlone

金虫 (著名写手)

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专业: 药剂学

祝福楼主~

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14楼2014-12-16 10:05:50

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mzhyan

15楼2014-12-16 13:03:15

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mlanqiang

16楼2014-12-16 13:14:56

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SCI-ICS

祝福

17楼2014-12-16 15:07:11

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liyuecoool

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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1.你的样品加入太多了，一般试剂盒只需要50mg-100mg样品即可，太多的话内源性的RNase太多，Trizol里的抑制剂抑制效果不完全。
2.你的电泳时间太久了，难免会分解严重。再次重复下试试，将电泳缓冲液TAE重新换制，电压调高(150V)，时间缩短（10-15min），只要能区分去三条带即可。
3.确保提取过程中操作严格，保持空气不要流动，离心机全程4℃。
4.你说的上样时会飘起来？是不是没有用Loading Buffer染色？不会是酒精没挥发完全，可以测量纯度（OD260/230）来观察，有酒精残留时候会有乱峰，参考乙醇的峰型。
希望对你有用，祝你实验顺利。

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