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abc5401908

银虫 (初入文坛)

[求助] 引物合成片段求助 已有1人参与

求助，这两个引物有18bp左右互补，想要进行PCR的100片段合成，退火后还进行延伸至头，形成平末端，想问下10μM的引物要加多少的量呀？（ 体系是引物1+引物2+酶+dNTP+buffer+水，95变性5min，56退火，72延伸20min，4保存）

引物合成片段求助
1_副本.png
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蓝扑扑
1楼 2014-12-10 22:18:33
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-11 21:34:31
具体引物浓度要求参考书上应该都有吧，有文献上用5pmol/L，但是我们都是用5uM/uL，效果也很好。本人觉得这个东西有点就行，多点也不影响。当然也可能我说的不对，自己试一试就知道了，不放心的话就做个梯度。
赞一下 回复此楼
踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
2楼2014-12-10 22:44:20
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