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abc5401908

银虫 (初入文坛)

[求助] 引物合成片段求助 已有1人参与

求助,这两个引物有18bp左右互补,想要进行PCR的100片段合成,退火后还进行延伸至头,形成平末端,想问下10μM的引物要加多少的量呀?( 体系是引物1+引物2+酶+dNTP+buffer+水,95变性5min,56退火,72延伸20min,4保存)

引物合成片段求助
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蓝扑扑
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-11 21:34:31
具体引物浓度要求参考书上应该都有吧,有文献上用5pmol/L,但是我们都是用5uM/uL,效果也很好。本人觉得这个东西有点就行,多点也不影响。当然也可能我说的不对,自己试一试就知道了,不放心的话就做个梯度。
踏踏实实做好自己,其他的事与你无关。
2楼2014-12-10 22:44:20
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