11楼: Originally posted by kamiles_007 at 2012-04-23 19:32:34:
问一个比较菜的问题啊，跨膜蛋白能通过加信号肽变成分泌蛋白吗？

楼: Originally posted by 小周 at 2012-03-07 11:16:29:
真巧，我也刚解决完一个跟这个一模一样的问题。
做两次PCR，一共设计3条引物。两条5‘的，一条包含部分信号肽序列和部分目的基因片段，用它和3’引物做第一次PCR，取1μl pcr产物用做二次PCR的模板。第二条5‘引 ...

楼: Originally posted by 小周 at 2012-03-07 11:20:17:
我当时也咨询过引物合成公司，他说随着引物长度的增加，出错的概率也增加，建议我全基因合成，而且手头有5,6个类似的信号肽，这个就太贵了。

楼: Originally posted by huguangdong at 2012-03-08 14:12:16:
顺便说一句，没必要像2楼说的那么复杂，直接设计好引物在5'端加上你的东西，就能扩增出来，引物的集合主要在3'端，所以5'端加我热为在80BP一下的长度都可以。