| 查看: 3400 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
带信号肽的长片段引物设计
|
||
|
我需要表达一些分泌的跨膜蛋白，但是表达载体没有分泌信号肽，所以需要人工PCR在序列前段添加信号肽。 现在引物长度大致为20bp片段+60bp信号肽+9bp酶切位点及保护碱基。 现在引物设计长度较长，请问谁有过相关方面的经验可以分享吗？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
kamiles_007» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家有没有遇到过没有信号肽有没有跨膜结构的基因？
已经有7人回复
- Takara 引物合成
已经有5人回复
- 如何设计引物扩增片段？做克隆的
已经有11人回复
- 做原核表达引物设计的有关问题
已经有14人回复
- 基因克隆表达中信号肽的问题
已经有11人回复
- 引物设计3‘端最后一个碱基的讨论
已经有13人回复
- 有关引物设计时加酶切位点
已经有8人回复
- 培养基浑浊 镜下无异物 扩病毒
已经有5人回复
- 怎样设计引物鉴定只有9bp缺失的DNA片段 ？
已经有4人回复
- 怎么判断目的基因序列中是否含有信号肽~~
已经有11人回复
- 原核表达引物设计的问题
已经有6人回复
- 有关miR-32引物
已经有3人回复
- 克隆大片段的序列如何设计引物
已经有4人回复
- 【求助/交流】引物合成
已经有17人回复
- 【求助/交流】引物设计公司
已经有8人回复
- 【求助/交流】设计的引物在NCBI blast中比对居然没有我的目的片段
已经有5人回复
- 【求助/交流】怎样设计目的基因的引物
已经有8人回复
- 【求助/交流】原核表达，预测的信号肽序列是否包括
已经有7人回复
- 【求助/交流】PCR片段大小问题
已经有13人回复
- 渗透泵控释片包衣膜破裂的问题
已经有6人回复
小周
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 11280.6
- 散金: 20
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1329
- 在线: 561.4小时
- 虫号: 688224
- 注册: 2009-01-05
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
4楼2012-03-07 11:20:17
2楼2012-03-07 10:45:38
小周
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 11280.6
- 散金: 20
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1329
- 在线: 561.4小时
- 虫号: 688224
- 注册: 2009-01-05
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzysllm(金币+5): ★★★★★最佳答案 感谢分享！ 2012-03-07 14:04:14
wzysllm(金币+25): ★★★★★最佳答案 再次对你的热心帮助表示感谢！ 2012-03-08 11:15:21
感谢参与，应助指数 +1
wzysllm(金币+5): ★★★★★最佳答案 感谢分享！ 2012-03-07 14:04:14
wzysllm(金币+25): ★★★★★最佳答案 再次对你的热心帮助表示感谢！ 2012-03-08 11:15:21
|
真巧，我也刚解决完一个跟这个一模一样的问题。 做两次PCR，一共设计3条引物。两条5‘的，一条包含部分信号肽序列和部分目的基因片段，用它和3’引物做第一次PCR，取1μl pcr产物用做二次PCR的模板。第二条5‘引物包含部分与第一条5'引物序列和余下的信号肽及酶切位点保护碱基等，PCR,，回收，OK! 另，由于设计两次PCR，出错的可能性升高，测序时可以多测几个，3or4个！ 我就是这样做的，没问题！ |
3楼2012-03-07 11:16:29
5楼2012-03-07 14:41:32
20