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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒的电泳问题 已有4人参与

我将质粒pKSV7进行双酶切,质粒是6900bp,切下的片段大概几十bp,所以应该没有这个条带,但是切过的质粒和完整的质粒电泳的时候是怎么分离开?几次电泳都没有看到两个分离的条带,是电泳时间不够嘛?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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jian212

铜虫 (小有名气)

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-01 16:23:00
酶切完全的话应该就只有一条带了啊,怎么还会有完整的质粒呢、
学习再学习,努力再努力。
2楼2014-12-01 15:47:13
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yangbin1

金虫 (正式写手)

★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-01 16:23:04
酶切彻底的话只有一条带。几十bp肯定看不到。这时已经没有完整质粒了。
3楼2014-12-01 15:56:56
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liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jian212 at 2014-12-01 15:47:13
酶切完全的话应该就只有一条带了啊,怎么还会有完整的质粒呢、

两种的buffer不一样,应该不可能完全切开,而且前几次的结果也证明有很多空质粒没切开
4楼2014-12-01 21:07:11
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korchagin

木虫 (小有名气)


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如果全切开了,那么就没有完整质粒
如果没有完全切开,那么你把大小正确的酶切质粒切胶纯化出来就行
不必纠结于那些没切开的
5楼2014-12-02 10:27:42
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般是看不到那个小的片段的。一种情况是小片段早就跑出去了,另外一种情况是大分子量的载体占主导,电泳上样量足够多,稍微跑出去一点点就停下来看,才能看到小片段。大部分都是可以切开的。
6楼2014-12-02 12:04:31
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