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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于质粒的电泳问题
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liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒的电泳问题 已有4人参与

我将质粒pKSV7进行双酶切，质粒是6900bp，切下的片段大概几十bp，所以应该没有这个条带，但是切过的质粒和完整的质粒电泳的时候是怎么分离开？几次电泳都没有看到两个分离的条带，是电泳时间不够嘛？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-12-01 14:08:14
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jian212

铜虫 (小有名气)
★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-01 16:23:00
酶切完全的话应该就只有一条带了啊，怎么还会有完整的质粒呢、
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学习再学习，努力再努力。
2楼2014-12-01 15:47:13
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yangbin1

金虫 (正式写手)
★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-01 16:23:04
酶切彻底的话只有一条带。几十bp肯定看不到。这时已经没有完整质粒了。
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3楼2014-12-01 15:56:56
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liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jian212 at 2014-12-01 15:47:13
酶切完全的话应该就只有一条带了啊，怎么还会有完整的质粒呢、

两种的buffer不一样，应该不可能完全切开，而且前几次的结果也证明有很多空质粒没切开
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4楼2014-12-01 21:07:11
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korchagin

木虫 (小有名气)
★
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如果全切开了，那么就没有完整质粒
如果没有完全切开，那么你把大小正确的酶切质粒切胶纯化出来就行
不必纠结于那些没切开的
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5楼2014-12-02 10:27:42
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般是看不到那个小的片段的。一种情况是小片段早就跑出去了，另外一种情况是大分子量的载体占主导，电泳上样量足够多，稍微跑出去一点点就停下来看，才能看到小片段。大部分都是可以切开的。
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6楼2014-12-02 12:04:31
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