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LemonT

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白半湿转膜实验，不是湿转膜 已有2人参与

第一次用，半湿转膜实验，也差不多就是干转膜，以前没用过，不会用，求高手讲解一下要注意什么，最好能给一下视频链接

关于蛋白半湿转膜实验，不是湿转膜
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关于蛋白半湿转膜实验，不是湿转膜-1
IMG20141128093353.jpg
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1楼 2014-11-28 09:37:25
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samanthaking78

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我这里用的就是这个，电压不能超过15V，电流按你的滤纸大小算，cm2大概2~3mA吧，太大会发热比较厉害，小一点儿问题不大。转膜时间看分子量，一般60min，150KDa以上1.5 h，整个板面用buffer润湿后使用。
用完洗板子用清水就可以，金属面有印子用稍硬的海绵擦干净，最后用纯净水冲洗一下，用完后晾干。
基本上就这些了吧，这个实验室一直用这种转膜，没出过问题。
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梦好莫催醒，由他好处行。
3楼2014-12-03 09:27:13
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这玩意很容易把上下两块板子烧了，使用前一定要认真读说明书，严格按要求操作。我自己用的是paqlab的PerfectBlue Semi-Dry Electro Blotter，转膜用Bjerrums buffer，电压不超过10V，转的时候注意一下是不是有大量发热，上下两块板子不能用纯有机溶剂洗，同时严格避免划伤板面。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2014-11-29 04:18:46
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