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LemonT

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白半湿转膜实验,不是湿转膜 已有2人参与

第一次用,半湿转膜实验,也差不多就是干转膜,以前没用过,不会用,求高手讲解一下要注意什么,最好能给一下视频链接

关于蛋白半湿转膜实验,不是湿转膜
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关于蛋白半湿转膜实验,不是湿转膜-1
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这玩意很容易把上下两块板子烧了,使用前一定要认真读说明书,严格按要求操作。我自己用的是paqlab的PerfectBlue Semi-Dry Electro Blotter,转膜用Bjerrums buffer,电压不超过10V,转的时候注意一下是不是有大量发热,上下两块板子不能用纯有机溶剂洗,同时严格避免划伤板面。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-11-29 04:18:46
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samanthaking78

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我这里用的就是这个,电压不能超过15V,电流按你的滤纸大小算,cm2大概2~3mA吧,太大会发热比较厉害,小一点儿问题不大。转膜时间看分子量,一般60min,150KDa以上1.5 h,整个板面用buffer润湿后使用。
用完洗板子用清水就可以,金属面有印子用稍硬的海绵擦干净,最后用纯净水冲洗一下,用完后晾干。
基本上就这些了吧,这个实验室一直用这种转膜,没出过问题。
梦好莫催醒,由他好处行。
3楼2014-12-03 09:27:13
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