| 查看: 2204 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
探讨质粒快速提取的方法和单克隆快速鉴定 已有4人参与
|
|||
|
20141122更新： 现在本虫做菌落鉴定一般都是先做菌p，后挑菌提质粒酶切鉴定。感觉做下来耗时很长。逛了下论坛，感觉是不是可以直接摇菌，然后电泳菌液和空载。后根据电泳结果快速提质粒酶切鉴定。现在就是质粒快提方法还没定好。 大家有啥好的方法吗？只想快速鉴定单克隆是否正确。 ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~分割线~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 首先声明，本虫只是想知道一下大家都有哪些快速提取质粒的方法，所以来开个帖子问问。  本虫一直在用的方法就是碱裂解法，一般溶液I（RNase A plus）、II、III后，氯仿抽提蛋白，后无水乙醇放-20沉淀20-30min。然后再用70%乙醇洗涤。晾干后，水回溶。 最近做原生质体的时候看到sheen lab有个10min质粒提取的方法，网址请猛戳：http://molbio.mgh.harvard.edu/sheenweb/protocols_reg.html。 英语不才就不在这里丢人啦…… 他的方法原理应该就是 苯酚/氯仿/异戊醇 抽提吧。RNA是用最后ddw（RNase）消除。 本虫搜索了下，也有人用水重悬菌体然后苯酚/氯仿/异戊醇抽提后异丙醇沉淀的。 所以，想问问大家，都在用啥快速提取质粒的方法。提取质量好，时间又比较短呢。请大家不吝赐教啦…… [ Last edited by conanyangqun on 2014-11-22 at 03:59 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有100人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒DNA快速提取方法与步骤
已经有3人回复
- 大肠杆菌培养 质粒提取后困惑
已经有16人回复
- 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？
已经有5人回复
- 求助 提取质粒跑胶没带
已经有3人回复
- 如何构建质粒以及提取它
已经有4人回复
- pet-32a质粒提取量低的原因
已经有8人回复
- 质粒提取和扩增鉴定
已经有5人回复
- 质粒快抽有条带，提取时却没有了，什么问题啊？
已经有15人回复
- Fosmid质粒提取问题
已经有7人回复
- 如何提高PET-28a质粒提取浓度？
已经有13人回复
- 关于质粒大量提取的方法求助
已经有6人回复
- 请帮我看看提取质粒的图是出了什么问题
已经有19人回复
- PCR扩增法制备低拷贝质粒（替代常规质粒提取）
已经有11人回复
- 关于乳酸菌质粒提取
已经有10人回复
- 请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
已经有15人回复
- 【求助/交流】大家讨论一下SDS在质粒提取中的作用吧
已经有5人回复
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
9楼2014-11-22 10:13:07
2楼2014-11-21 07:20:49
流氓一个
金虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 1394.3
- 散金: 91
- 红花: 4
- 帖子: 304
- 在线: 90.3小时
- 虫号: 2471867
- 注册: 2013-05-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2014-11-21 10:18:28
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2014-11-21 11:19:04
