应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 【求助】western blot 跑胶，蛋白跑到一半模糊一片是怎么回事？
111/2返回列表12下一页
查看: 8343  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

飘飘零

铁虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】western blot 跑胶，蛋白跑到一半模糊一片是怎么回事？ 已有4人参与

如图，刚开始十几分钟还好好的，差不多到分离胶就开始模糊一片，求指点

【求助】western blot 跑胶，蛋白跑到一半模糊一片是怎么回事？
31C15F4522E058C3B68943F11CAEB017.png


【求助】western blot 跑胶，蛋白跑到一半模糊一片是怎么回事？-1
]LHM{$A}G_$)_J48GS@X~NN.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-20 15:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考虑一下电泳缓冲液的问题······
赞一下 回复此楼
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
2楼2014-11-21 15:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanfei211923

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这是正常的，到最后应该就是一条线了
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-21 16:16:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘飘零

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-11-21 15:52:06
考虑一下电泳缓冲液的问题······

缓冲液都是配成母液之后，现用现稀释的
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-21 22:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘飘零

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fanfei211923 at 2014-11-21 16:16:51
这是正常的，到最后应该就是一条线了

可是，考马斯亮蓝染胶之后，发现溴酚蓝跑模糊之后的蛋白条带也模糊啊，都不知道该怎么办了
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-21 22:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wys476488620

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

环境温度多少  电压多高？ 是不是电压不稳   你配胶的试剂是不是新的 ？
赞一下 回复此楼
踏踏实实的就行了
6楼2014-11-23 20:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老liao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

样品量太多或浓度太高，指示剂容易在电泳过程中弥散，只要蛋白浓度不是高得离谱，染色后的条带应该不受太大影响，建议你少加点样；
外槽电泳buffer可以多加点，免得胶内发热量过大而散不出去；

另外问一下，你们从来不用预制胶吗？
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-24 13:07:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘飘零

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wys476488620 at 2014-11-23 20:44:32
环境温度多少  电压多高？ 是不是电压不稳   你配胶的试剂是不是新的 ？

正常的室温，电压在100到160V之间变动，我用的是恒流，电压会变动应该正常吧，试剂才配没多久，而且我用了别的实验室的配也胶也是这样的结果，人家跑就很漂亮，应该是蛋白处理不好的缘故。
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-26 13:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘飘零

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 老liao at 2014-11-24 13:07:27
样品量太多或浓度太高，指示剂容易在电泳过程中弥散，只要蛋白浓度不是高得离谱，染色后的条带应该不受太大影响，建议你少加点样；
外槽电泳buffer可以多加点，免得胶内发热量过大而散不出去；

另外问一下，你们 ...

我上样20微升，因为浓度很低的，20微升样品才几微克，我一直在愁蛋白丰度的问题，再加上loadding buffer很稠啊，变性之前加的buffer总感觉不太准。每次跑胶都跑不好，散热倒是还可以。
赞一下 回复此楼
9楼2014-11-26 13:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘飘零

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 老liao at 2014-11-24 13:07:27
样品量太多或浓度太高，指示剂容易在电泳过程中弥散，只要蛋白浓度不是高得离谱，染色后的条带应该不受太大影响，建议你少加点样；
外槽电泳buffer可以多加点，免得胶内发热量过大而散不出去；

另外问一下，你们 ...

实验室一般能自己做的不会去买，不能自己做的才会考虑购买，还有跑完电泳后我用考马斯蓝染过胶的，发现溴酚蓝没模糊之前的蛋白条带很漂亮，模糊之后的条带就不行了，不是模糊不清就是没有，求指点啊，这些问题怎么解决
赞一下 回复此楼
10楼2014-11-26 13:40:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘飘零 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭