| 查看: 8090 | 回复: 3 | ||
[求助]
western blot伯乐电泳仪的问题请教！谢谢大家！
|
| 本人是WB新手，想请教大家一个问题。最近做的两次WB电泳时都电泳了1H左右但是连MARKER都没有跑出孔道。第一次预跑时是正常的，结果吃了个饭回来就屏幕上出现了E1的错误，查说明书说可能是电路的问题或是BUFFER的问题。今天重配了BUFFER,胶也新做的，没有出现E1错误。但是等了1H了，MARKER还是连孔道都没有跑出。之前在别人实验室用的电泳仪做的都很好（都是旧的），现在新换了一个实验室，买的是伯乐的电泳仪及电泳槽（都是新的）。这两周做BDNF蛋白，浓缩胶是15%的，分离胶是5%的，RUNNING BUFFER是新配的，电泳槽中间的BUFFER也没过梳子齿的胶了（保证内外是闭合的）。跑胶用的是浓缩胶恒压60。值得注意的是，我今天预跑时感觉里面有上升的小气泡，但是点样完正式跑时就觉得里面的上升的气泡变少了。我担心是胶的浓度高了（以前我们老师用的12%的浓缩胶，不过BDNF的分子量也在15%的范围）就等了1H，结果还是没有变化，就看了下电流。结果发现电流很小，就5左右（以前用过别人实验室的伯乐做转膜没有这种情况，恒压80的话，电流就10几）。关掉电泳仪后重新试，先设恒流20，结果START后它又自动跳成恒压了。然后恒流还是很小。到底是什么原因啊？下周老板就要结果了，现在还没做出来，很急！谢谢大家帮忙解答！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有218人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 询问western blot关于Bio-Rad电转仪的使用
已经有6人回复
- 温州医学院健康与环境生态研究所实验室招聘
已经有6人回复
- 有关EMSA（凝胶阻滞）的，是否有aEMSA（高浓度琼脂糖凝胶阻滞）这种技术？
已经有3人回复
- 关于cyt C问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】电泳时候，什么时候用稳压？什么时候用稳流？？？
已经有8人回复
- 【求助/交流】求助：如何选择凝胶成像仪？
已经有11人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-07-10 01:32:32
xiwenhui
木虫 (正式写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1826.2
- 红花: 3
- 帖子: 877
- 在线: 486.8小时
- 虫号: 554283
- 注册: 2008-05-06
- 专业: 抗体工程学
3楼2013-07-10 13:04:03
4楼2013-07-13 00:19:00
