应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA跑普通PCR疑问
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 3097  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

圣者为王

铁虫 (初入文坛)

[交流] cDNA跑普通PCR疑问 已有3人参与

利用新提出来的cDNA跑普通的PCR，10μl体系，退火温度利用53℃，actin基因能跑出来，但是为什么目的基因跑不出来，请求各位帮忙解决，不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-19 23:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙士超

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-20 17:10:17
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下
赞一下 回复此楼
不放弃就有希望
2楼2014-11-20 11:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-11-20 13:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙士超 at 2014-11-20 11:49:37
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下

平时也有用cDNA做模版p的，我试一下换个体系试试，谢过了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-21 10:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happydove at 2014-11-20 13:26:31
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧

这基因正在做重组表达，第一步就卡住了，引物设计有问题应该也有很多杂带不是吗？非常感谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-21 10:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘芬玲

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
actin能扩出来说明模板没什么大问题，主要应该是引物的问题，先调一下退火温度试试
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-22 09:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 圣者为王 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +8 一定上岸aaa 2026-03-27 12/600 2026-03-28 13:08 by 松花缸1201
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +5 星野? 2026-03-26 5/250 2026-03-28 08:17 by Iveryant
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +10 路痴小琪 2026-03-27 10/500 2026-03-28 03:36 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 考研调剂 +10 呼呼？~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 316求调剂 +5 江辞666 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:08 by hypershenger
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭