应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA跑普通PCR疑问
61/1返回列表
查看: 3155  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

圣者为王

铁虫 (初入文坛)

[交流] cDNA跑普通PCR疑问 已有3人参与

利用新提出来的cDNA跑普通的PCR，10μl体系，退火温度利用53℃，actin基因能跑出来，但是为什么目的基因跑不出来，请求各位帮忙解决，不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-19 23:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙士超

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-20 17:10:17
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下
赞一下 回复此楼
不放弃就有希望
2楼2014-11-20 11:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-11-20 13:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙士超 at 2014-11-20 11:49:37
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下

平时也有用cDNA做模版p的，我试一下换个体系试试，谢过了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-21 10:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happydove at 2014-11-20 13:26:31
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧

这基因正在做重组表达，第一步就卡住了，引物设计有问题应该也有很多杂带不是吗？非常感谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-21 10:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘芬玲

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
actin能扩出来说明模板没什么大问题，主要应该是引物的问题，先调一下退火温度试试
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-22 09:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 圣者为王 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭