应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA跑普通PCR疑问
61/1返回列表
查看: 3179  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

圣者为王

铁虫 (初入文坛)

[交流] cDNA跑普通PCR疑问 已有3人参与

利用新提出来的cDNA跑普通的PCR，10μl体系，退火温度利用53℃，actin基因能跑出来，但是为什么目的基因跑不出来，请求各位帮忙解决，不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-19 23:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙士超

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-20 17:10:17
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下
赞一下 回复此楼
不放弃就有希望
2楼2014-11-20 11:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-11-20 13:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙士超 at 2014-11-20 11:49:37
以前用cDNA做模板P吗？可以考虑换一下模板，退火温度一般影响不是非常大，只有亮不亮的区别，再就是你可以换一个20μl体系试一下

平时也有用cDNA做模版p的，我试一下换个体系试试，谢过了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-21 10:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圣者为王

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happydove at 2014-11-20 13:26:31
内参能扩出来 一般模板问题不大
那就从你实验的设计考虑，这个基因有表达吗
还有你设计的引物没问题吧

这基因正在做重组表达，第一步就卡住了，引物设计有问题应该也有很多杂带不是吗？非常感谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-21 10:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘芬玲

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
actin能扩出来说明模板没什么大问题，主要应该是引物的问题，先调一下退火温度试试
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-22 09:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 圣者为王 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭