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gaowei1160银虫 (初入文坛)
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关于DNA浓度和DNA长度的问题 已有2人参与
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| 最近提了一批样品，电泳检测总DNA时，发现很多都降解了，但是浓度都还挺高的。听师兄师姐说，浓度高有可能是DNA降解导致的，所以我就有个疑问，测DNA浓度的仪器是根据吸光度算的，不知道这个吸光度是和根据总的碱基数计算的，还是根据链的条数来算的？如果是根据DNA条数的话，那降解的DNA条数多了，浓度可能就会高了；如果是根据碱基数算的话，那降不降解应该对浓度不会产生影响。一直搞不明白，希望各位了解这方面知识的大神能够给些解释！ |
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dongdekun
新虫 (初入文坛)
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2楼2014-11-03 09:03:43
【答案】应助回帖
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gaowei1160(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-11-24 19:08:17
gaowei1160(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-11-24 19:08:17
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紫外分光光度计的原理是不同的分子、原子会有特定波长的吸收，影响因素有浓度大小和结构不同（后者是在分子水平上），你所说的问题应该是纠结于长链变成短链算不算结构变化，会不会直接决定吸收值得问题。 实际上，DNA分子在溶液中是呈游离状态，同等浓度的长链和短链在同一波长下的吸收光是一样的，不会因为链长在溶液中可能形成特殊结构（可以想象系鞋带）而改变光吸收，而且也不会形成那种情况。 其实你也可以把它想象成按照碱基数量来决定吸光值，但实际肯定不是那样的，原因就是你去测dNTPs和DNA，同样的浓度肯定不一样多。 以上都是个人想法，希望能够帮助你 |
3楼2014-11-24 15:33:08
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