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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 怎样根据DNAmark的亮度来推测自己提的DNA的浓度啊？？？
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cr7ka8

金虫 (初入文坛)

[求助] 怎样根据DNAmark的亮度来推测自己提的DNA的浓度啊？？？ 已有3人参与

如题，求大神指点。。。
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1楼 2014-04-25 21:51:55
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小虫s

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cr7ka8(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-26 12:11:41
cr7ka8: 金币+1, ★有帮助 2014-04-26 21:42:49
可以参考quantity one 软件的使用方法，利用该软件对光密度值的分析，来计算样品的上样量，那里有比较详尽的介绍
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2楼2014-04-25 21:57:13
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yyc12596

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cr7ka8: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-04-26 12:08:19
cr7ka8(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-26 12:11:52
我自己当时毛估的方法(举例TAKARA 250 bp DNA Ladder Marker):

这是公司说明书：
■ 浓度
约500 ng/ 5μl  
■ 制品说明
本制品由双链DNA片段250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2250 bp、3000 bp、4500 bp组成，共8条带。其中1000 bp的DNA片段为指示带，显示亮带。本品已混有上样缓冲液，可直接用于凝胶电泳。




你的样品上样5ul，Marker也上样5ul，跟Marker的亮带1000bp差不多亮的样本大约就是500ng。
以此类推。
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3楼2014-04-26 04:03:56
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cr7ka8: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-04-26 21:42:20
marker说明书上有~通常marker跑出来的各条带深浅不一~没各条带的DNA含量都不一样~说明书会给出解释~比如：我们1kb的marker1ul上样量里含DNA总量是0.5ug~所有条带加起来是0.5ug~没条带的含量不同~最亮的是3000kb处的条带~作为一个标志~它的含量是125ng~条带与marker作对比能推断出DNA的大小~亮度跟marker作比较则能推断出DNA的含量~当然都是估计~
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坚持就是胜利！
4楼2014-04-26 20:25:32
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yuren2009

木虫 (正式写手)
Image Lab软件中就可以估算，根据marker灰度，作线性估算。
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学习使你立于不败之地
5楼2014-04-26 23:42:12
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