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染色剂的浓度对DNA电泳亮度有多大影响已经有5人回复
如何参照maker的亮度估算其它DNA的浓度？已经有9人回复

1楼2014-04-25 21:51:55

小虫s

木虫 (小有名气)

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可以参考quantity one 软件的使用方法，利用该软件对光密度值的分析，来计算样品的上样量，那里有比较详尽的介绍

2楼2014-04-25 21:57:13

yyc12596

新虫 (著名写手)

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我自己当时毛估的方法(举例TAKARA 250 bp DNA Ladder Marker):

这是公司说明书：
■ 浓度
约500 ng/ 5μl
■ 制品说明
本制品由双链DNA片段250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2250 bp、3000 bp、4500 bp组成，共8条带。其中1000 bp的DNA片段为指示带，显示亮带。本品已混有上样缓冲液，可直接用于凝胶电泳。

你的样品上样5ul，Marker也上样5ul，跟Marker的亮带1000bp差不多亮的样本大约就是500ng。
以此类推。

3楼2014-04-26 04:03:56

2012csc

至尊木虫 (知名作家)

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marker说明书上有~通常marker跑出来的各条带深浅不一~没各条带的DNA含量都不一样~说明书会给出解释~比如：我们1kb的marker1ul上样量里含DNA总量是0.5ug~所有条带加起来是0.5ug~没条带的含量不同~最亮的是3000kb处的条带~作为一个标志~它的含量是125ng~条带与marker作对比能推断出DNA的大小~亮度跟marker作比较则能推断出DNA的含量~当然都是估计~

坚持就是胜利！

4楼2014-04-26 20:25:32

yuren2009

木虫 (正式写手)

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Image Lab软件中就可以估算，根据marker灰度，作线性估算。

学习使你立于不败之地

5楼2014-04-26 23:42:12