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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做荧光定量PCR时，两次用的模板一样，但结果不一样
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修香恋

铜虫 (小有名气)

[求助] 做荧光定量PCR时，两次用的模板一样，但结果不一样已有1人参与

我用同一个模板做了两次定量PCR，可是两次结果不一样，第一次做的表达量下调而且有显著性差异，但第二次的就没有显著性差异，请教各位原因是什么？
       谢谢！
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1楼2014-11-01 10:05:15
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cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
修香恋(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-01 19:44:09
第一，你每次做的时候怎么加样，条件是否一致，是否做了复孔？
第二，你的同一个样本是否分装，反复冻融也会影响cDNA的量。
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科研炮灰
2楼2014-11-01 10:45:49
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修香恋

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-11-01 10:45:49
第一，你每次做的时候怎么加样，条件是否一致，是否做了复孔？
第二，你的同一个样本是否分装，反复冻融也会影响cDNA的量。

我是每个样品做了四个重复。样品并没有分装，第一次用完后-20℃保存，然后第二次拿出来用的。那这样的话这两次结果我只能以第一次的为准吗
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3楼2014-11-01 14:26:05
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