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纸鸢花

金虫 (正式写手)

[求助] 细菌全基因组测序中不同的scaffold如何处理

刚刚接触这方面知识,测了一个细菌的精细图,回来后测序公司拼接成18个scaffold,想问问这些scaffold之间是什么关系,可能小的被包含在大的里吗?因为还存在许多gap,我应该如何处理这些scaffold呢?
非常感谢了
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2009355147

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是遇到同样问题,和你一起求助。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-10-28 19:42:21
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朱多龙

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
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纸鸢花: 金币+1 2014-10-29 12:45:44
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-31 23:21:12
不会的,每个Scaffold都是基因组打断后测序拼接的结果。之所以有很多scaffold因为这些序列拼接不到一块了,可能有一些短序列没有测出来。每个scaffold 都是基因组上的一部分。
3楼2014-10-29 09:02:24
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peterrjp

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
纸鸢花: 金币+1 2014-10-29 12:45:56
纸鸢花: 金币+1 2014-10-29 12:46:52
如果两个scaffold是包含关系或者有交集,就会被拼成一个更大的scaffold,因此不会出现那种情况。
4楼2014-10-29 09:17:50
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纸鸢花

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-10-29 09:02:24
不会的,每个Scaffold都是基因组打断后测序拼接的结果。之所以有很多scaffold因为这些序列拼接不到一块了,可能有一些短序列没有测出来。每个scaffold 都是基因组上的一部分。

是基因组的一部分,可是因为较大的Scaffold中存在gap,所以还是有可能把小的包含在里头啊?
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5楼2014-10-29 12:45:40
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纸鸢花

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by peterrjp at 2014-10-29 09:17:50
如果两个scaffold是包含关系或者有交集,就会被拼成一个更大的scaffold,因此不会出现那种情况。

但是中间因为存在gap的缘故,很有可能没有测出包含或交集,这种情况下我们该怎么处理呢
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6楼2014-10-29 12:46:48
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本帖仅楼主可见
7楼2014-10-29 13:10:31
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小花猫阿

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-30 11:30:49
基因组de novo测序,通过reads拼接获得Contigs后,往往还需要构建454 Paired-end库或Illumina Mate-pair库,以获得一定大小片段(如3Kb、6Kb、10Kb、20Kb)两端的序列。基于这些序列,可以确定一些Contig之间的顺序关系,这些先后顺序已知的Contigs组成Scaffold。
8楼2014-10-29 13:36:42
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朱多龙

木虫 (小有名气)


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引用回帖:
6楼: Originally posted by 纸鸢花 at 2014-10-29 12:46:48
但是中间因为存在gap的缘故,很有可能没有测出包含或交集,这种情况下我们该怎么处理呢...

哈哈,这种就没办法了,现在即使是精细genome测序也不能完全测出所有的序列。其实这不会影响你对相关基因序列的使用的。放心吧!
9楼2014-10-29 18:29:46
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Bio_in

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
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kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2014-10-30 11:30:57
首先,你需要理解基因组组装的名词解释Reads、Contig和Scaffold.
测序仪下机后的序列就是reads,reads通过overlap关系,组装成Contig。
contig内部是没有gap的,contig与contig之间通过mate-pair 库确定顺序,通过关系,将contig链接成scaffold,scaffold里面的contig与contig之间一般是由gap的,如果通过reads能填上,就少一些gap。但一般scaffold与scaffold之间的关系是不知道的,scaffold与scaffold之间的gap也是不知道的。你现在有18个scaffold,应该也覆盖了基因组的大部分,你完全可以用这个精细图进行基因预测和注释。
关键是你测序的目的,出于不同的目的,数据的分析方案也是不一样的。
10楼2014-10-29 20:55:10
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