| 查看: 1446 | 回复: 5 | ||||
1989青苹果铁杆木虫 (职业作家)
|
[交流]
有没有人做过细菌全基因组测序DNA提取的？ 已有2人参与
|
| 大家使用试剂盒提取还是手提的呢？方法有吗？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 科研&生活。 |
» 猜你喜欢
求调剂 材料与工程 324分 专硕
已经有3人回复
-
化学工程与技术324调剂
已经有15人回复
-
一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以
已经有12人回复
-
环氧灌封胶 抗沉剂
已经有4人回复
-
268分085602化学工程调剂
已经有22人回复
-
考研调剂
已经有18人回复
-
还有化工二轮调剂的学校吗
已经有39人回复
-
277 数一104，学硕，求调剂
已经有8人回复
-
0854调剂
已经有5人回复
-
材料工程302分求调剂
已经有15人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 水体细菌基因组总DNA的提取
已经有6人回复
- 细菌全基因组测序
已经有5人回复
- 植物中真菌基因组提取试剂盒
已经有12人回复
- 公布的基因组没有这个基因的注释，而用其他软件发现了这个基因，如何？
已经有4人回复
- 求助：基因组DNA电泳无明显条带，成弥散状
已经有12人回复
- 细菌总DNA提取条带诡异
已经有7人回复
- 哪里可以查植物基因组DNA大小及相关信息
已经有22人回复
- 手提基因组方法遇到的问题
已经有12人回复
- 【资料】番茄基因组完成测序（附Nature全文）
已经有73人回复
- 求 很纯的单链DNA 提取 测序方法
已经有8人回复
- 想知道某种微生物代谢产物的产生基因并对该基因进行研究，该如何操作？论文也行
已经有6人回复
- 怎样在NCBI中查找一物种的全基因组？
已经有12人回复
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 一个二倍体植物的全基因组测序程序及花费？
已经有18人回复
- 血液中提取细菌DNA
已经有5人回复
- EcoRI 酶切细菌基因组切不开
已经有19人回复
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- 一个关于全基因组测序的问题
已经有6人回复
- 白菜全基因组图谱“谜底”揭晓
已经有10人回复
- CTAB提取细菌DNA
已经有15人回复
- 【求助】【急】请问有谁做过细胞核STR分型检测和线粒体DNA测序？急求详细方法！
已经有15人回复
- 【求助/交流】寻找基因组序列中的单拷贝基因
已经有8人回复
- 【求助/交流】第一、第二代基因测序技术
已经有7人回复
- 【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
已经有11人回复
yandz680717
木虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 4764.1
- 散金: 100
- 红花: 3
- 帖子: 668
- 在线: 345.5小时
- 虫号: 1160259
- 注册: 2010-12-01
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2013-10-06 08:17:36
yandz680717
木虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 4764.1
- 散金: 100
- 红花: 3
- 帖子: 668
- 在线: 345.5小时
- 虫号: 1160259
- 注册: 2010-12-01
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
3楼2013-10-06 08:18:13
1989青苹果
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 8479.4
- 散金: 6351
- 红花: 10
- 帖子: 3654
- 在线: 399.9小时
- 虫号: 2165918
- 注册: 2012-12-04
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2013-10-06 14:14:22
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库，怎样提取高质量的DNA很关键。 细菌基因组DNA的制备 一、材料 细菌培养物。 二、设备 移液管, 高速冷冻离心机, 台式离心机，水浴锅。 三、试剂 1、CTAB/NaCl溶液：4.1g NaCl溶解于80ml H2 O,缓慢加入10g CTAB,加水至100ml。 2、其它试剂：氯仿:异戊醇(24:1)，酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)，异丙醇，70% 乙醇，TE，10% SDS，蛋白酶 K (20mg/ml或粉剂)，5mol/L NaCl。 四、操作步骤： 1. 100ml 细菌过夜培养液, 5000rpm离心10分钟, 去上清液。 2. 加9.5ml TE悬浮沉淀, 并加0.5ml 10% SDS, 50μl 20mg/ml(或1mg干粉)蛋白酶 K, 混匀, 37℃保温1小时。 3. 加1.5ml 5mol/L NaCl, 混匀。 4. 加1.5ml CTAB/NaCl溶液, 混匀, 65℃保温20分钟。 5. 用等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提, 5000rpm离心10分钟, 将上清液移至干净离心管。 6. 用等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提, 取上清液移至干净管中。 7. 加1倍体积异丙醇, 颠倒混合, 室温下静止10分钟，沉淀DNA。 8. 用玻棒捞出DNA沉淀, 70%乙醇漂洗后, 吸干,溶解于1ml TE, -20℃保存。如DNA沉淀无法捞出,可5000rpm离心, 使DNA沉淀。 9. 如要除去其中的RNA, 可以按本章第三节中操作步骤处理。 来源：百博明创（北京） |
5楼2013-10-16 09:57:02
1989青苹果
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 8479.4
- 散金: 6351
- 红花: 10
- 帖子: 3654
- 在线: 399.9小时
- 虫号: 2165918
- 注册: 2012-12-04
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
谢谢啦 6楼2013-10-16 11:06:17
