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Charlie2013_

银虫 (小有名气)

[求助] 问一个有关设计PCR优化体系实验的问题

初次接触分子,如果一下用词有误,请勿喷。。。
还请多多指教
正题,想设计一个优化EST-PCR体系的正交试验
问题1:先确定反应体系各组分用量?还是先确定各组分浓度?
在查阅的文章中,一般都是先设计(筛选最优的) 各组分浓度的 正交试验。那各部分用量怎么确定?一般都没有说明,随便确定一个还是怎样。于是我糊涂了。。。。囧

问题2:如果先设计浓度的试验,之后需要分别设计用量的实验吗?
例如:A*B,B*C...E*A,这A~E 5个因素彼此的用量~

问题3:(小白问题)诸如Mg离子浓度(1.5mM/L)、dNTP浓度(2.5mM/L)、引物浓度(0.1~0.5mM/L)和TaqDNA聚合酶浓度(5U/μL),是它们在当下反应体系中的浓度吗?
1.5mM/L 和1.5mM/μL 哪个对啊????
系不系从试剂公司买回来的,需要自己最后稀释还是???完全懵懵的状态~~~~
TAT
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