24小时热门版块排行榜    

查看: 4163  |  回复: 5

小小一枚

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒降解严重 已有3人参与

我在连接产物导入DH5α之后挑转化子验证,提出的质粒酶切验证出现弥散带,但是质粒第二天就降解没了,这会是什么原因啊,请各位大神帮忙
第一张是当天酶切的图;第二张是第二天酶切的图,marker后面是原始质粒。

质粒降解严重
2014-10-23 .gif


质粒降解严重-1
2014-10-24 .gif
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小小一枚(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-26 20:53:04
这个问题我也曾经碰到过过。试试用其他的酶切切看,buffer 也换换,然后对比看是不是还会出现这个情况。
2楼2014-10-25 22:20:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小小一枚(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-26 20:53:13
你确定你的质粒提取出来了?看图上没有条带啊,你最好先搞清楚质粒有没有提取出来再考虑酶切的问题,把提取出来的质粒测一个浓度,再跑一个电泳,看看效果如何,之后再分别用菌液质粒做模板做一个PCR验证,确保质粒是提取出来了的
没有做不到,只有想不到!
3楼2014-10-26 09:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小一枚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by caihang at 2014-10-25 22:20:23
这个问题我也曾经碰到过过。试试用其他的酶切切看,buffer 也换换,然后对比看是不是还会出现这个情况。

我已经换过了,但还是降解
4楼2014-10-27 14:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小一枚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 王平阳 at 2014-10-26 09:05:43
你确定你的质粒提取出来了?看图上没有条带啊,你最好先搞清楚质粒有没有提取出来再考虑酶切的问题,把提取出来的质粒测一个浓度,再跑一个电泳,看看效果如何,之后再分别用菌液质粒做模板做一个PCR验证,确保质粒 ...

我提出来了,这个图片传上来不清晰,主要是提出的质粒放在-20℃一晚上就降解了
5楼2014-10-27 14:25:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是不是没有提出来啊,上面两张图片上除了marker以外,没有其他带啊,你再重新提吧···
···
6楼2014-10-27 14:58:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小一枚 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 7/350 2026-08-25 03:24 by BZKMTicpDhFj
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见