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supermary000

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC峰形问题

最近在检测一个化合物的纯度，含有两个F,还有两个C手性中心，以前没有分离过类似的东西，用的安捷伦的苯基柱，流动相A相是0.05%TFA水，B相是乙腈，梯度B相从50%升到90%，走出来峰形很难看，但在质谱上看确实是一个化合物，不知道是不是手性的影响，还请大家多交流交流啊，感谢！！！！！是不是必须要用手性柱才可以？？？

HPLC峰形问题
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1楼 2014-10-24 13:53:41
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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supermary000: 金币+1, 我用初始比例也不行啊，有该善但是峰形很宽 2014-10-27 14:16:11
我个人觉得你的样品溶解或者流动相体系有问题，建议你用初始比例的流动相溶解样品进样试试。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
2楼2014-10-24 14:04:20
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匿名

禁虫 (知名作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
supermary000: 金币+1, 试过了，还是不行，感谢回复 2014-10-27 14:38:58
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3楼2014-10-25 06:41:49
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
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supermary000: 金币+1, 感谢回复，试过了，不是啊 2014-10-27 14:42:07
可能是样品的溶解问题吧，呵呵呵呵呵。
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4楼2014-10-25 07:48:28
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金虫一号

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
supermary000: 金币+1, 降低过样品进样体积，也换过溶剂，还是不行，感谢回复 2014-10-27 14:41:44
可能是样品的浓度太高，降低样品浓度或换溶剂溶解样品。
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5楼2014-10-26 21:21:28
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cenlm

金虫 (小有名气)
★ ★
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supermary000: 金币+1, 没有四丁基氢氧化铵，我再试试别的吧，谢谢 2014-10-27 14:43:29
试试四丁基硫酸氢铵，呵呵，似乎是EZchrome啊
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加油
6楼2014-10-27 09:01:08
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
supermary000(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-10-27 17:24:20
supermary000(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2014-10-28 23:03:11
你用苯基柱，你的化合物是不是也含有苯基？含有2个F,你是想分离苯环上不同点位的取代异构体？最好能把化合物结构给出来。如果你的柱子没问题，你的化合物应该有伯胺或叔胺基团，才会在0.05%的TFA酸性流动相中拖尾。要解决拖尾，1.换适合的柱子，选择封尾较好的色谱柱，硅胶柱表面的硅羟基少了，拖尾自然就好了；2.流动相中加离子对试剂，加磺酸类离子对试剂，流动相pH值控制在2~3；3.调高流动相pH值，最好比你分析的化合物pka值高1.0以上，但要注意你色谱柱的耐受性，你最好选用耐高pH值的色谱柱，4.如果你对峰型要求不是特别苛刻，流动相用20mmol KH2PO4，用磷酸调pH2.5做缓冲液，也能减少你的拖尾。
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7楼2014-10-27 14:41:44
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huasangma

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
supermary000: 金币+1, 是啊，我也考虑这个问题了，回头想用正相手性柱测测看，感谢回复 2014-10-28 16:50:12
质谱上的分子量一样，也有可能是异构体啊，从你谱图来看，应该是异构体造成的。
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8楼2014-10-27 20:20:49
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supermary000

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kf1009 at 2014-10-27 14:41:44
你用苯基柱，你的化合物是不是也含有苯基？含有2个F,你是想分离苯环上不同点位的取代异构体？最好能把化合物结构给出来。如果你的柱子没问题，你的化合物应该有伯胺或叔胺基团，才会在0.05%的TFA酸性流动相中拖尾。 ...

非常感谢，我用的离子对试剂，现在峰形也可以了，您说的拖尾解决方法很受用，谢谢啦
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9楼2014-10-28 16:51:13
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