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supermary000金虫 (小有名气)
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[交流]
HPLC峰形问题
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最近在检测一个化合物的纯度，含有两个F,还有两个C手性中心，以前没有分离过类似的东西，用的安捷伦的苯基柱，流动相A相是0.05%TFA水，B相是乙腈，梯度B相从50%升到90%，走出来峰形很难看，但在质谱上看确实是一个化合物，不知道是不是手性的影响，还请大家多交流交流啊，感谢！！！！！是不是必须要用手性柱才可以？？？ 捕获.PNG |
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kf1009
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supermary000(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-10-27 17:24:20
supermary000(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2014-10-28 23:03:11
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| 你用苯基柱，你的化合物是不是也含有苯基？含有2个F,你是想分离苯环上不同点位的取代异构体？最好能把化合物结构给出来。如果你的柱子没问题，你的化合物应该有伯胺或叔胺基团，才会在0.05%的TFA酸性流动相中拖尾。要解决拖尾，1.换适合的柱子，选择封尾较好的色谱柱，硅胶柱表面的硅羟基少了，拖尾自然就好了；2.流动相中加离子对试剂，加磺酸类离子对试剂，流动相pH值控制在2~3；3.调高流动相pH值，最好比你分析的化合物pka值高1.0以上，但要注意你色谱柱的耐受性，你最好选用耐高pH值的色谱柱，4.如果你对峰型要求不是特别苛刻，流动相用20mmol KH2PO4，用磷酸调pH2.5做缓冲液，也能减少你的拖尾。 |
7楼2014-10-27 14:41:44
kf1009
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