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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 我做HPLC出的峰峰宽比较大 峰形难看 这是什么原因？
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stocknople

新虫 (初入文坛)

[求助] 我做HPLC出的峰峰宽比较大 峰形难看 这是什么原因？

请哪位大虾给我指导一下   如果HPLC出的峰峰宽比较大  达到了2min以上  峰形十分难看   好像是个TT    这是什么原因？  请不吝赐教！！！
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1楼 2011-07-09 15:21:09
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 多谢应助回帖~ 2011-07-09 18:13:54
stocknople(金币+1): 谢谢 我会认真处理 咱们以后多交流 2011-07-09 22:15:39
引用回帖:
Originally posted by stocknople at 2011-07-09 15:21:09:
请哪位大虾给我指导一下   如果HPLC出的峰峰宽比较大  达到了2min以上  峰形十分难看   好像是个TT    这是什么原因？  请不吝赐教！！！

先确认一下方法是现成的还是自己摸的，如果是现成的，就考虑一下色谱柱和流动相的问题，如果方法是自己摸索的，色谱柱没问题的前提下，考虑下缓冲盐的种类及PH的选择，适当地调一下柱温，峰型会有所改善。试试吧
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gwmgyp
2楼2011-07-09 16:18:05
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stocknople

新虫 (初入文坛)
我的柱温是40度  你说合适么？我一共做多个物质，其它的物质峰形都还很好，唯独这个不行  难道是柱子的问题？莫非是我的样品问题？？
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3楼2011-07-09 22:19:03
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chyb1981

金虫 (正式写手)
★
xiaodu2007693(金币+1): 谢谢交流 2011-07-10 14:10:46
看你的流动相了，比如说，你流动相是酸性的，而你的化合物是碱性的，一般就容易出现这个问题了
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4楼2011-07-10 10:07:31
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郭允乐

金虫 (小有名气)
★
xiaodu2007693(金币+1): 谢谢交流 2011-07-10 14:11:48
你的化合物是否有酸碱性？如果酸性就加磷酸或冰醋酸，碱性就加三乙胺或二乙胺
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1/3靠本事，1/3靠关系，1/3靠运气
5楼2011-07-10 10:44:24
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
xiaodu2007693(金币+2): 谢谢 2011-07-10 14:10:03
1.看看是不是过载，可以适当减小进样浓度或进样体积；
2.看看是不是溶剂太强，可以使用低强度溶剂尝试一下；
3.看看仪器系统管路中漏液或者有增加死体积的因素，排除一下；
4.看看是不是柱筛板被堵塞或柱头塌陷。
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心似白云常自在，意如流水任东西。
6楼2011-07-10 13:46:07
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j115090587

金虫 (正式写手)
楼上的结合起来研究下就很全面了
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7楼2011-07-11 08:58:05
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主
引用回帖:
Originally posted by stocknople at 2011-07-09 15:21:09:
请哪位大虾给我指导一下   如果HPLC出的峰峰宽比较大  达到了2min以上  峰形十分难看   好像是个TT    这是什么原因？  请不吝赐教！！！

如果问题现在尚未解决，是否考虑换一根色谱柱呢？还有一个问题是：不知你做的多个化合物是什么情况下的多个物质，属于复方制剂呢，还是一个化学原料药与其它几个杂质呢？如果是复方的话，更换一下色谱柱试试； 如果是后者的话，且峰型难看的是其中一个杂质，那么做系统适用性时没必要将这个杂质加的量太大，因为真实样品中这个杂质的量不会有那么多，这样峰型就会改善，也不用发愁了。
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gwmgyp
8楼2011-07-14 12:31:51
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嘟嘟才靖

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
75553楼: Originally posted by 郭允乐 at 2011-07-10 10:44:24
你的化合物是否有酸碱性？如果酸性就加磷酸或冰醋酸，碱性就加三乙胺或二乙胺

那请问乙二胺浓度为多少呢 谢谢了
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9楼2013-03-25 07:55:15
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谭姐姐

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by gwmgyp at 2011-07-14 12:31:51
如果问题现在尚未解决，是否考虑换一根色谱柱呢？还有一个问题是：不知你做的多个化合物是什么情况下的多个物质，属于复方制剂呢，还是一个化学原料药与其它几个杂质呢？如果是复方的话，更换一下色谱柱试试； 如果 ...

我目前就遇到楼上的这个说法，就是原料药的几个杂质跑的峰都好，只有其中一个杂质峰（又宽又矮，峰面积还很大，峰高很小）真不知道该怎么办了

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10楼2020-11-02 23:34:33
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