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累透社

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】HPLC的基线漂移并有杂质峰 已有3人参与

大家好,我做的实验是制剂的稳定性试验,加速试验都已经做了两个月了。现在液相出了点问题,在找解决的方案,希望大家给点意见。
出现的问题是1)液相的基线不断漂移,2)进样后在主峰的后面总有两个杂质峰
我觉得是柱子污染了,冲了柱子,可是结果还是一样。换另外一根柱子,没有杂质峰但主峰的峰形变了;改变样品溶剂,主峰峰形才变回来。
我现在的解决方案是换一根新柱子,重新开始实验。大家认为有没有必要呢?另外由于换了一根新柱子后,出峰效果不理想,我需不需要重新设计过色谱条件和样品的配制方法呢?或者除换柱子,还有没有其他更好的解决方法?
谢谢大家。
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Alina8912

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-05-09 22:28:27
首先你每次分析样品时,会进相应的空白溶剂或者空白辅料,看空白溶剂或空白辅料在相应的位置是否出峰,如果相应出峰,可以相应的扣除。如果说想找出出杂质峰的原因,想换色谱柱,选择相同厂家相同型号的色谱柱尝试,如果杂质峰没有了,那可能是色谱柱污染了。如果是常规的C18柱的话,更换色谱柱的话重现性应该还是可以的。不至于需要更换色谱方法吧。
只要基线漂移,可能是系统没平衡好,或者灯得能量不足。
以上仅作参考。
2楼2011-05-09 22:11:36
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brownfield

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
既然换柱子后基线平稳了那应该就不是氘灯的事了,如果说你的样品处理都没问题的话,建议还是再生一下柱子
3楼2011-05-10 00:32:19
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zhihua0207

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-05-10 09:21:16
这个情况下,能不换柱子还是不换的好,正如二楼所说,做一下空白对照,实在不行可以手动积分,只要杂质峰面积小于规定就行了,毕竟前面都用同一根柱子做了这么长时间了,要是以前没出这种杂质峰,那就是柱子废了,或者什么柱芯,泵头啊什么的也堵了,建议全部换一下,要是还有杂质峰而且面积也大,那就再考虑换柱子吧
一般换了柱子之后峰行不会有太大差别的,要用同种规格的柱子,只不过峰面积会有所不同,也可用手动积分调成面积和以前一样,主要调的是出峰保留时间(调流速,并保持峰形)
立志改变,勇于超越
4楼2011-05-10 09:14:44
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