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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC分析时峰分不开呀！！！
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)

[交流] HPLC分析时峰分不开呀！！！

最近做代谢分析，需要检测3种物质的含量，但是跑液相的时候发现他们都是强极性的物质，我用的C18反相柱做的，在柱中基本不保留，就把流动相改为了100% ph3.2 的KH2PO4盐溶液，虽然知道用纯盐对主子不好，但是没得办法了，即使这样还是勉强能出来三个峰，但是无法定量。各种条件都试了，PH也调了，盐浓度也调过，但是还是不能完全分开。后来听说可以用氨基柱来分，好不容易借了个柱子，结构又发现我要检测的物质都在柱子上冲不下来了。。。。:cry。。。小女子实在没得办法了。。。求牛人指教指教呀。。。

三个物质分别为葡萄糖，葡萄糖酸，葡萄糖胺
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1楼2013-07-07 16:41:18
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★ ★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
淡竹2066: 金币+1 2013-07-08 19:36:15
有没有离子交换柱 例如Sepax的Carbomix H-NP系列 其实用氨基柱可以把它们冲下来 流动相用乙腈-水（85:15） 检测器估计得用示差折光喽  紫外的话  估计用210nm  但是葡萄糖估计不会有吸收峰了
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淡竹2066
3楼2013-07-07 17:38:00
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
氨基柱可以试试看了。
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5楼2013-07-07 18:22:44
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Home369

木虫 (著名写手)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
求指教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-07-07 18:25:22
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claralee

铜虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
传说amide的柱子分糖比较好，待测物都是强极性的话，也可以试试HILIC柱子
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8楼2013-07-08 12:43:31
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sr65970361

铜虫 (著名写手)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
(^V^)

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2013-07-08 13:14:41
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
离子交换柱可以
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12楼2013-07-08 14:11:29
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2013-07-07 17:38:00
有没有离子交换柱 例如Sepax的Carbomix H-NP系列 其实用氨基柱可以把它们冲下来 流动相用乙腈-水（85:15） 检测器估计得用示差折光喽  紫外的话  估计用210nm  但是葡萄糖估计不会有吸收峰了

就是没有离子交换柱的，我看好多文献都说用离子柱
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13楼2013-07-08 19:36:01
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by claralee at 2013-07-08 12:43:31
传说amide的柱子分糖比较好，待测物都是强极性的话，也可以试试HILIC柱子

没得这种柱子，我们实验室只有氨基柱和C18的柱子
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14楼2013-07-08 19:39:08
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2013-07-08 19:39:08
没得这种柱子，我们实验室只有氨基柱和C18的柱子...

氨基柱也可以的哈  楼主按照那个流动相试试喃
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15楼2013-07-08 19:46:31
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zuo0607

新虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
可用HILIC色谱柱试着分离
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16楼2013-07-10 12:27:12
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ufoking

木虫 (小有名气)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
东曹的amide柱子分离糖还是比较好的，之前有和他们的经理交流过，价格大概在5000左右
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17楼2013-07-10 15:35:39
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readytogo2楼
2013-07-07 16:54   回复  
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
zblf19874楼
2013-07-07 17:57   回复  
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haoruijia87楼
2013-07-08 11:24   回复  
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icebergwu9楼
2013-07-08 12:47   回复  
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beacky94211楼
2013-07-08 13:36   回复  
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
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