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淡竹2066

铜虫 (小有名气)


[交流] HPLC分析时峰分不开呀!!!

最近做代谢分析,需要检测3种物质的含量,但是跑液相的时候发现他们都是强极性的物质,我用的C18反相柱做的,在柱中基本不保留,就把流动相改为了100% ph3.2 的KH2PO4盐溶液,虽然知道用纯盐对主子不好,但是没得办法了,即使这样还是勉强能出来三个峰,但是无法定量。各种条件都试了,PH也调了,盐浓度也调过,但是还是不能完全分开。后来听说可以用氨基柱来分,好不容易借了个柱子,结构又发现我要检测的物质都在柱子上冲不下来了。。。。:cry。。。小女子实在没得办法了。。。求牛人指教指教呀。。。

三个物质分别为葡萄糖,葡萄糖酸,葡萄糖胺
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claralee

铜虫 (初入文坛)



淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
传说amide的柱子分糖比较好,待测物都是强极性的话,也可以试试HILIC柱子
8楼2013-07-08 12:43:31
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查看全部 17 个回答
★ ★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
淡竹2066: 金币+1 2013-07-08 19:36:15
有没有离子交换柱 例如Sepax的Carbomix H-NP系列 其实用氨基柱可以把它们冲下来 流动相用乙腈-水(85:15) 检测器估计得用示差折光喽  紫外的话  估计用210nm  但是葡萄糖估计不会有吸收峰了

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3楼2013-07-07 17:38:00
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)



淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
氨基柱可以试试看了。
5楼2013-07-07 18:22:44
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Home369

木虫 (著名写手)



淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
求指教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2013-07-07 18:25:22
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