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淡竹2066

铜虫 (小有名气)

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[交流] HPLC分析时峰分不开呀！！！

最近做代谢分析，需要检测3种物质的含量，但是跑液相的时候发现他们都是强极性的物质，我用的C18反相柱做的，在柱中基本不保留，就把流动相改为了100% ph3.2 的KH2PO4盐溶液，虽然知道用纯盐对主子不好，但是没得办法了，即使这样还是勉强能出来三个峰，但是无法定量。各种条件都试了，PH也调了，盐浓度也调过，但是还是不能完全分开。后来听说可以用氨基柱来分，好不容易借了个柱子，结构又发现我要检测的物质都在柱子上冲不下来了。。。。

:cry。。。小女子实在没得办法了。。。求牛人指教指教呀。。。

三个物质分别为葡萄糖，葡萄糖酸，葡萄糖胺

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1楼 2013-07-07 16:41:18

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淡竹2066

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引用回帖:

3楼: Originally posted by lifucheng at 2013-07-07 17:38:00
有没有离子交换柱例如Sepax的Carbomix H-NP系列其实用氨基柱可以把它们冲下来流动相用乙腈-水（85:15）检测器估计得用示差折光喽紫外的话估计用210nm 但是葡萄糖估计不会有吸收峰了

就是没有离子交换柱的，我看好多文献都说用离子柱